DESCRIÇÃO MORFOLÓGICA DOS HEMÓCITOS DO GAFANHOTO TROPIDACRIS COLLARIS (STOLL, 1813) (ORTHOPTERA: ROMALEIDAE)

MORPHOLOGIC DESCRIPTION OF THE HEMOCYTES OF THE TROPIDACRIS COLLARIS GRASSHOPPER (STOLL, 1813) (ORTHOPTERA: ROMALEIDAE

RESUMO

Em virtude da grande variedade na forma, função e número de hemócitos entre as diferentes espécies de insetos, a presente pesquisa teve o objetivo de descrever morfologicamente essas células presentes na hemolinfa do gafanhoto Tropidacris collaris (Stoll, 1813), por meio da microscopia de luz, utilizando-se técnica de coloração pelo Giemsa. A descrição morfológica foi realizada no Laboratório de Histologia do Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal da Universidade Federal Rural de Pernambuco (UFRPE). Os insetos foram obtidos da criação existente no Laboratório de Entomologia do Departamento de Biologia da UFRPE. Os resultados revelaram que a hemolinfa de T. collaris é constituída pelos seguintes hemócitos: prohemócitos, plasmócitos, coagulócitos e granulócitos.

PALAVRAS-CHAVE
Hemolinfa; hemócitos; gafanhoto; Tropidacris collaris

ABSTRACT

Due to the great variety in the form, function and hemocytes number among the different species of insects, the present research had was aimed at describing the morphology of these present in the hemolymph of the Tropidacris collaris grasshopper (Stoll, 1813), by means of light microscopy, with staining by Giemsa. The morphologic description was carried out in the Laboratory of Histology of the Department of Morphology and Animal Physiology of the Rural Federal University of Pernambuco (UFRPE). The insects were obtained from the insect rearing facilities of the Laboratory of Entomology of the Department of Biology of UFRPE. The results revealed that the hemolymph of T. collaris is constituted by the following hemocytes: prohemocytes, plasmocytes, coagulocytes and granulocytes.

KEY WORDS
Hemolymph; hemocytes; grasshopper; Tropidacris collaris

INTRODUÇÃO

A hemolinfa dos insetos está contida na cavidade geral do corpo (hemocele), onde banha vários órgãos internos e também entre os apêndices e as cavidades tubulares das veias das asas. Sendo o único fluído extracelular no corpo do inseto, é usualmente pouco colorido ou pode ter uma ligeira cor esverdeada ou amarelada dada por determinados pigmentos solúveis; constitui 15-75% do volume do inseto; a quantidade e composição variam com a espécie e sua condição fisiológica. Ela consiste de um componente líquido (plasma sangüíneo) e numerosas células sangüíneas livres flutuantes ou hemócitos (COMSTOCK, 1962; UVAROV, 1966; ROMOSER, 1973; MARANHÃO, 1976; RICHARDS & DAVIES, 1977, 1983; LARA, 1979; BORROR et al., 1989; SNODGRASS, 1993; GALLO et al., 2002; SILVA et al., 2002).

ROMOSER (1973) e BORROR et al. (1989) mencionaram as funções da hemolinfa sendo: lubrificante, transporte, armazenamento, meio hidráulico, proteção (fagocitose, encapsulação, desintoxicação, coagulação, cicatrizar lesões e fatores protetores não celulares) e formação de outros tecidos.

Quanto a composição química da hemolinfa, MUTTKOWSKI (1923), ROMOSER (1973) e SNODGRASS (1993) revelaram considerável variação, sendo alguns dos maiores constituintes: água, sais inorgânicos, materiais nitrogenados, ácido orgânicos, carboidratos, lipídios, aminoácidos, proteínas, pigmentos, gases e hemócitos.

Embora uma grande variedade de funções tenha sido atribuída aos hemócitos, somente quatro são bem documentadas e geralmente aceitas; são elas: (1) fagocitose de pequenas partículas, (2) encapsulação de grandes objetos estranhos, (3) coagulação do sangue por aglutinação celular e/ou por contribuição da precipitação do plasma, e (4) armazenamento e distribuição de materiais nutritivos (LITTLE, 1972; ROCKSTEIN, 1974; MARANHÃO, 1976; BORROR et al., 1989; INQUE et al., 2001; RUSSO et al., 2001; SILVA et al., 2002).

Provavelmente, o mais conhecido e mais usado sistema de classificação dos hemócitos é o que foi desenvolvido por JONES (1962), o qual está baseado no estabelecimento de que há três tipos celulares bem definidos na maioria dos insetos (prohemócitos ou proleucócitos, plasmatócitos ou plasmócitos e hemócitos granulares ou granulócitos), um ou mais de quatro outros tipos em muitos insetos (cistócitos ou coagulócitos, células esféricas, adipohemócitos e oenocitóides) e dois tipos extremamente especializados em alguns poucos insetos (podócitos e células vermiformes).

Segundo ROCKSTEIN (1974), uma visão mais moderada, considera 3 ou 4 categorias na hemolinfa de orthopteróide, mas não há consenso nos tipos de células. Muitos autores não reconhecem oenocitóides na hemolinfa de orthopteróide, porém HOFFMANN (1970) considerou que eles ocorrem em Locusta, juntamente com granulócitos, plasmatócitos e coagulócitos.

Dentre as espécies de gafanhoto destaca-se o Tropidacris collaris (Stoll, 1813) (Orthoptera: Romaleidae), conhecido vulgarmente como tucurão. Trata-se de uma espécie de importância econômica, principalmente, porque causa danos na mangueira (Mangifera indica) e ao coqueiro (Coccus nucifera)(CHAGAS et al., 1995). Segundo SANTOS, (1982) e DURATON et al. (1987) é atribuído ainda a essa espécie, ataques as folhas e frutos do abacateiro, bananeira, mandioca, algodoeiro, limoeiro, vinha, seringueira e às vezes da cana-de-açúcar e arroz.

Existem várias pesquisas sobre a biologia e anatomia macroscópica dos gafanhotos (UVAROV, 1966; MARANHÃO, 1976; BUZZI & MIYAZAKI, 1999; GALLO et al., 2002); no entanto, pouco se conhece sobre sua anatomia microscópica, principalmente, com relação aos hemócitos. Assim, devido a grande variedade na forma, função e número de hemócitos entre as diferentes espécies de insetos, a presente pesquisa teve o objetivo de descrever morfologicamente os hemócitos presentes na hemolinfa de T. collaris, por meio da microscopia de luz, utilizando-se técnica de coloração especial, visando obter subsídios para um melhor entendimento da sua fisiologia.

MATERIAL E MÉTODOS

Foram utilizados adultos machos de T. collaris, com 14 dias após a última ecdise, procedentes da criação existente no Laboratório de Entomologia do Departamento de Biologia da UFRPE. Esses insetos eram mantidos a temperatura ambiente, em gaiolas teladas, contendo recipiente com água e alimentados com folhas de mangueira que eram trocadas a cada 2 dias Para coleta da hemolinfa utilizou-se dez insetos, onde se realizou uma incisão no trocanter do segundo par de patas, colhendo-se gotículas de hemolinfa diretamente sobre lâminas secas e previamente limpas, segundo uma modificação da metodologia descrita por HUSTERT (1999). Em seguida procedeu-se o esfregaço, espalhando assim a hemolinfa em camadas finas (JUNQUEIRA & JUNQUEIRA 1983). Os esfregaços foram mantidos a temperatura ambiente por 20 a 30 min, para adesão dos hemócitos à lâmina. Posteriormente, foram fixados em metanol por cerca de 5 min, sendo submetidas posteriormente à técnica de coloração pela solução de Giemsa (3 gotas em 1 mL de água destilada), permanecendo nesse corante por 3 min (SILVA et al., 2000). A análise morfológica foi realizada utilizando-se microscópio de luz, da marca Olympus BX-49, e fotografados em fotomicroscópio Olympus BX-51.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Nos esfregaços da hemolinfa de T. collaris observou-se uma grande quantidade de hemócitos com forma e tamanho variados (Fig. 1A). No entanto, de um modo geral as células mais observadas em todos os esfregaços foram os plasmócitos que apresentaram morfologia variando de esférica a oval, com prolongamentos citoplasmáticos nesta última forma. Essas células apresentam citoplasma hialino com núcleo central em número que varia de um a dois (Fig. 1B).

Fig. 1
Fotomicrografias dos hemócitos de T. collaris: A. observar morfologia variada, Aumento ± 428X. B. Plasmócitos (setas), algumas com prolongamentos citoplasmáticos (ponta de setas). Aumento ± 1071X. C. Prohemócito. Aumento ± 1071X.

A coloração pelo Giemsa identificou no esfregaço mais três tipos diferentes de hemócitos: prohemócitos, coagulócitos e granulócitos. Os prohemócitos apresentam aspecto esférico com núcleo bastante volumoso, reduzindo o citoplasma a uma pequena faixa periférica (Fig. 1C). Essas células foram os únicos tipos de hemócitos que apresentaram figuras sugestivas de mitose (Fig. 2D).

Fig. 2
D. Prohemócito em mitose. Aumento ± 1071X. E. Coagulócitos (setas). Aumento ± 1071X. F. Granulócito (seta). Aumento ± 1071X.

Os coagulócitos caracterizam-se por apresentar no seu citoplasma vários vacúolos de tamanhos diferentes, os quais aparecem freqüentemente próximos à superfície da célula, além de apresentar núcleo central (Fig. 2E).

Os granulócitos caracterizam-se por apresentarem numerosos grânulos citoplasmáticos e núcleo central (Fig. 2F).

No que se refere aos hemócitos, WHEELER et al. (1993), SODERHALL & CERENIUS (1998) e WILSON et al. (1999) relataram que os insetos não possuem o sistema imunológico sofisticados dos vertebrados. Contudo eles são particularmente resistentes aos seus inimigos naturais. Para se defender, eles desenvolvem, uma série de mecanismos tais como: síntese de peptídeos antimicrobianos, inibidores de proteases, coagulação da hemolinfa, defesas celulares etc.

As defesas celulares são executadas pelos hemócitos (DUNN, 1986). Essas células circulam livremente na hemolinfa, mas, após a invasão de bactérias, fungos, vírus ou protozoários rapidamente migram para o local da infecção e, eventualmente fagocitam e destroem os invasores (SILVA et al., 2000; RUSSO et al., 2001).

Os resultados mostraram que os hemócitos mais observados na hemolinfa de adultos T. collaris foram os plasmócitos. Segundo SILVA et al. (2000), RUSSO et al. (2001) e GIULIANINI et al. (2003) essas células apresentam diâmetro variando entre 7,1μm, e 9,7μm, estando envolvidas no processo de fagocitose, onde após receberem sinais da presença de bactérias ou outro microorganismo, estendem protrusões finas e rígidas chamadas filopódias, as quais exercem um papel importante na fagocitose. Esses mesmos autores relatam ainda que essas células, em sua maioria, apresentam-se mononucleadas, porém ocasionalmente podem ser binucleadas, o que está de acordo com as nossas descrições para esse tipo de hemócito.

Os prohemócitos apresentam diâmetro de 6,9 μm, caracterizando-se pelo tamanho volumoso do núcleo, o qual chega a atingir cerca de 4 mm de diâmetro (GIULIANINI et al., 2003). Segundo vários autores essas células estão envolvidas no processo de hematopoiese, pois se dividem ativamente originando os demais tipos de hemócitos (CHIANG et al., 1988; FENOGLIO et al., 1993; RUSSO et al., 1994; LAVINE & STRAND 2002; SILVA et al., 2002).

Os coagulóctitos encontrados em T. collaris, apresentaram características similares às observadas por GIULIANINI et al. (2003). Devemos mencionar ainda que GILLESPIE et al., (2000) relataram que em Schistocerca gregária, inoculado com fungo Metarhizium anisopleiae, foram identificados três tipos de hemócitos: plasmócitos, granulócitos e coagulócitos.

Os granulócitos apresentam diâmetro variando entre 7,9 μm, a 12,9μm, sendo bastante numerosas em algumas espécies de insetos, porém em outras são pouco freqüentes (ROCKSTEIN, 1974; GIULIANINI et al., 2003). GILLESPIE et al. (2000) e TOGO et al. (2000) citaram que essas células, juntamente com os plasmócitos são os tipos mais freqüentemente observados nos processos de defesa tais como: fagocitose, encapsulação e formação de nódulos. GALLO et al. (2002) relataram ainda que os granulócitos ou são células em degeneração ou são trofócitos, desempenhando assim função no transporte de materiais nutritivos.

CONCLUSÕES

A hemolinfa de T. collaris é constituída pelos seguintes hemócitos: prohemócitos, plasmócitos, coagulócitos e granulócitos.

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  01 Abr 2021
• Data do Fascículo
  Jan-Mar 2005

Histórico

• Recebido
  28 Fev 2005
• Aceito
  30 Mar 2005