DETECÇÃO DE ANTICORPOS PARA LEPTOSPIRA SPP. EM ANIMAIS E FUNCIONÁRIOS DO ZOOLÓGICO MUNICIPAL DE UBERABA, MG

DETECTION OF ANTIBODIES AGAINST LEPTOSPIRA SPP. IN ANIMALS AND EMPLOYEES OF THE MUNICIPAL ZOO OF UBERABA, MG, BRAZIL

RESUMO

O presente estudo teve como objetivo detectar anticorpos contra Leptospira spp. pelo teste de soroaglutinação microscópica em animais e funcionários do Zoológico Municipal de Uberaba, MG. Foram colhidas amostras de sangue de 166 animais entre mamíferos, répteis, peixes e aves e dos 36 funcionários. Dos animais estudados, 17 (10,24%) foram reagentes para anticorpos contra Leptospira spp. Os sorovares encontrados nas diferentes espécies foram: Grippotyphosa em uma espécie Cerdocyon thous (Cachorro-do-mato); Canicola em uma espécie Chrysocyon brachiurus (Lobo-Guará); Andamana e Icterohaemorrhagiae em duas espécies Leopardus pardalis(Jaguatirica); Canicola e Icterohaemorrhagiae em duas espécies Puma concolor (Suçuarana); Icterohaemorrhagiae em duas espécies Tayassu tajacu (Cateto); Andamana em duas espécies Geochelone spp. (Jabuti); Patoc em uma espécie Trachemys scripta (Tigre d’água); Canicola em seis espécies Oreochromis niloticus (Tilápia); Icterohaemorrhagiae em uma espécie Rattus rattus (Rato de telhado). Os sorovares mais freqüentes foram Canicola 8 (47,05%); Icterohaemorrhagiae 5 (29,41%) e Andamana 2 (11,76%). O título 100 foi o mais prevalente com 35,3% entre as espécies reagentes. As aves os gatos domésticos errantes e os funcionários do zoológico foram negativos para os sorovares analisados. Dentre as espécies estudadas, os mamíferos e os peixes apresentaram maior sororeatividade. Destaca-se a importância de mais estudos em animais silvestres e em de cativeiro e sua relevância no contexto da epidemiologia da Leptospirose.

PALAVRAS-CHAVE
Leptospira; sorovar; zoonose; animais silvestres; zoológico

ABSTRACT

The objective of the present study was to detect antibodies against Leptospira spp. by the microscopical seroagglutination test in animals and employees of the municipal zoo of Uberaba, MG. Blood samples of 166 animals including mammals, reptiles, fish and poultry and of the 36 employees were collected. Of all studied animals, 17 (10.02%) were reactant to antibodies against Leptospira spp. The sorovars found in the different species were: Grippotyphosa in a Cerdocyon thous species; Canicola in a Chrysocyon brachiurus species; Andamana and Icterohaemorrhagiae in 2 species of Leopardus pardalis ; Canicola and Icterohaemorrhagiae in 2 species of Puma concolor; Icterohaemorrhagiae in two species of Tayassu tajacu; Andamana in 2 species of Geochelone spp.; Patoc in a Trachemys scripta specie; Canicola in six species of Oreochromis niloticus; Icterohaemorrhagiae in a Rattus rattus specie. The most frequent sorovars were Canicola 8 (47.05%); Icterohaemorrhagiae 5 (29.41%) and Andamana 2 (11.76%). The titer 1/100 was the strongest with 35.3% in all reactant agents. The poultry, the stray domestic cats and the employees of the zoo were negative for the analyzed sorovars. In all studied species, the mammals and the fish presented the most seroactivity. The importance of more studies in both wild and captive animals and the relevance to Leptospira epidemiology can be seen.

KEY WORDS
Leptospirosis; sorovars; zoonosis; wild animals; zoo

INTRODUÇÃO

Investigações sobre infecção por leptospiras em animais silvestres têm sido demonstradas em roedores, (BENGIS et al., 2005), edentatas, carnívoros e artiodáctilos os quais podem atuar como fonte de infecção (MICHNA et al., 1970).

O melhor conhecimento da leptospirose na fauna silvestre é de grande importância para o controle e profilaxia da enfermidade nas espécies domésticas e também no homem (SOSA et al., 1988). Na fauna silvestre, os sinais relatados são semelhantes aos apresentados por animais domésticos, havendo descrição de baixo índice de fertilidade, nascimento de crias fracas, abortamentos e transtornos oculares (ALVARES et al., 1996).

Levantamentos sorológicos têm demonstrado o envolvimento de diferentes espécies sinantrópicas e silvestres das ordens Didelphimorfia e Rodentia, como potenciais disseminadores dos diferentes sorovares de Leptospira spp. (SANTA ROSA et al., 1975; HARTSKEERL & TERPSTRA, 1996).

Poucos estudos evidenciam a presença da leptospirose acometendo populações cativas, relatando óbito em primatas (SHIVE et al., 1969; SÁ et al., 1999), guanaco (Esgyrn Guanaco) (HODGIN et al., 1984) e ariranhas (Pteronura brasiliensis) (FARIAS et al., 1999). No Brasil estudos epidemiológicos sobre infecção por Leptospira spp. em animais silvestres são escassos (GIRIO, 1999; LINS & LOPES, 1984).

CORRÊA et al. (2004) realizaram um levantamento sorológico para leptospirose em animais silvestres mantidos em cativeiro na Fundação Parque Zoológico de São Paulo, no período de 1996 a 1999, em que das 302 amostras de soros analisadas, 59 (19,5%) foram reagentes para SAM.

No estudo de GUERRA-NETO et al. (2004), realizado em felídeos neotropicais do Criadouro de animais silvestre da Itaipu Binacional e do Zoológico Municipal Bosque Guarani em Foz do Iguaçu no Estado do Paraná, no total de 61 animais analisados, 28 animais foram positivos, representando 45,9% dos animais analisados foram reagentes para a prova de SAM.

Pela escassez de dados e a relevância dos animais silvestres no contexto epidemiológico da Leptospirose o objetivo do presente estudo foi avaliar a freqüência de infecção por Leptospira spp. em animais e funcionários de um Zoológico.

MATERIAIS E MÉTODOS

O presente estudo foi realizado no Zoológico Municipal de Uberaba, MG, durante o ano de 2004/2005. Foram colhidas amostras de sangue de 166 animais entre mamíferos, répteis, peixes e aves (Tabela 1) além de amostras de sangue de 8 gatos domésticos (Felis cattus); 27 ratos de telhado (Rattus rattus) e de 36 funcionários da Instituição.

Tabela 1
Número de amostras estudas para cada espécie animal do Zoológico Municipal de Uberava, 2004/2005.

Nº.de ordem	Nome científico	Nome vulgar	Nº. de amostras
1	Alouatta caraya	Bugio	2
2	Cerdocyon thous	Cachorro do mato	2
3	Cebus apella	Macaco-Prego	3
4	Chrysocyon brachyurus	Lobo-Guará	1
5	Herpaillurus yagouaroundi	Gato-Mourisco	2
6	Leopardus pardalis	Jaguatirica	3
7	Licalopex vetutus	Raposa-do-Campo	2
8	Procyon cancrivorus	Mão-Pelada	1
9	Puma concolor	Suçuarana/Onça-Parda	4
10	Tayassu tajacu	Cateto	2
11	Amazona aestiva	Papagaio-Verdadeiro	4
12	Amazona amazonica	Papagaio-do-Mangue	1
13	Amazona xanthops	Papagaio-Galego	1
14	Ara ararauna	Arara-Canindé	4
15	Aramides cajanea	Saracura-três-potes	1
16	Aratinga aurea	Periquito-Rei	2
17	Aratinga jandaya	Jandaia-Verdadeira	1
18	Aratinga leucophthalmus	Araguaris/Maritaca/Maracanã	5
19	Aratinga solstitialis	Jandaia-Sol	1
20	Bubo virginianus nacurutu	Corujão-do-Mato	1
21	Buteo magnirostris	Gavião-Carijó	2
22	Buteo albicaudatus	Gavião-de-Rabo-Branco	2
23	Caracara plancus	Carcará	1
24	Cariama cristata	Seriema	2
25	Heterospizias meridionalis	Gavião-Caboclo	1
26	Jabiru mycteria	Tuiuiú/Jabiru	1
27	Boa constrictor	Jibóia	3
28	Caiman latirostris	Jacarés-do-Papo-Amarelo	1
29	Geochelone spp.	Jabuti	16
30	Paleosuchus trigonatus	Jacaré-Coroa	1
31	Phrynops geoftroanus	Cágado-de-Barbicha	12
32	Trachemys scripta	Tigre-D’água	20
33	Tupinambis teguixin	Lagarto-Teiu	1
34	Othus choliba	Corujinha-do-Mato	3
35	Phasianus colchicus	Faisão-Coleira	2
36	Pavo cristatus	Pavão-Azul	2
37	Ramphastos toco	Tucano-Toco	3
38	Rhea americana	Ema	3
39	Syrigma sibilatrix	Maria-faceira	1
40	Theristicus caudatus	Curicaca	1
41	Tyto alba	Suindara/Coruja-das-torres	3
42	Oreochromis niloticus	Tilápia-do-Nilo	6
43	Hoplias malabaricus	Traíra	1

A contenção química dos animais estudados foi realizada de acordo com protocolos anestésicos previamente descrito (PACHALY & BRITO, 2000).

A colheita foi realizada por meio de punção venosa, utilizando-se seringas de insulina para as aves e para os demais, seringas de 3 e 5 mL e agulhas estéreis de insulina tamanhos 25/7, 25/8 e 27,5. A veia de escolha para colheita, bem como a quantidade de sangue a ser colhido e tamanho da agulha variou de acordo com a espécie, idade e massa corporal do animal. As amostras de sangue dos animais foram separados por centrifugação durante cinco minutos por 700 G no Laboratório do hospital veterinário de Uberaba (HVU), o soro obtido foi colocado em tubos Eppendorf de 1 mL, devidamente identificados e mantidos em freezer à temperatura de -20º C até a realização da sorologia. As amostras de sangue dos funcionários foram colhidos e separados no Laboratório Médico Especializado de Uberaba (LAMEL).

Os anticorpos para Leptospira spp. foram detectados pela prova de Soroaglutinação Microscópica (SAM) utilizando-se culturas vivas de leptospiras em meio enriquecido (EMJH) (FAINE, 1999). Os soros reagentes na triagem inicial foram reexaminados com sete diluições seriadas de razão dois e foram selecionados apenas amostras com titulação mínima de 100 (Cutoff), o título do soro considerado positivo foi aquele que sua maior diluição apresentou pelo menos 50% de aglutinação, quando a amostra apresentou reação cruzada para dois ou mais sorovares, foi considerado o sorovar que apresentou maior título.

As variantes sorológicas de Leptospira spp. empregadas como antígenos foram Australis, Bratislava, Autumnalis, Butembo, Castellonis, Bataviae, Canicola, Wwhitcombi, Grippotyphosa, Hebdomadis, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae, Javanica, Panama, Pomona, Pyrogenes, Hardjo, Wolffi, Shermani, Andamana, Patoc e Sentot.

O estudo sorológico foi realizado no Laboratório de Bacteriologia do Departamento de Medicina Veterinária Preventiva da Universidade Estadual Paulista (UNESP-Jaboticabal).

RESULTADOS

Dos 166 animais testados 17 apresentaram anticorpos anti-leptospira pelo teste de Soroaglutinação Microscópica (SAM). Dentre os positivos haviam 8 mamíferos, 2 répteis, 6 peixes e 1 roedor. A distribuição da reatividade para os sorovares patogênicos foi: Canicola em 8 (47,05%); Icterohaemorrhagiae em 5 (29,41%) e Andamana 2 (11,76%).

As aves e os gatos domésticos errantes mostraram-se negativos para os sorovares estudados. Em relação às amostras dos 36 funcionários nenhuma apresentou qualquer titulação de anticorpos anti-leptospira. Quanto às espécies estudadas os mamíferos e os peixes apresentaram maior sororeatividade com 47,06 e 35,3%, respectivamente.

Tabela 2
Distribuição das espécies sororreagentes para diversos sorovares de Leptospira spp. no Zoológico Municipal de Uberaba, MG, 2004/2005.

Espécie	Número de animais examinados	Número de animais positivos %			Sorovares encontrados
Cerdocyon thous	2	1	-	50%	Grippotyphosa
Chrysocyon brachyurus	1	1	-	100%	Canicola
Leopardus pardalis	3	2	-	66,6%	Andamana Icterohaemorrhagiae
Puma concolor	4	2	-	50%	CanicolaIcterohaemorrhagiae
Tayassu tajacu	2	2	-	100%	Icterohaemorrhagiae
Geochelone spp.	16	1	-	25%	Andamana
Trachemys scripta	20	1	-	5%	Patoc
Oreochromis niloticus	7	6	-	85,75%	Canicola
Rattus rattus	27	1	-	3,0%	Icterohaemorrhagiae

Tabela 3
Distribuição das espécies com anticorpos antileptospira de acordo com a titulação no Zoológico Municipal de Uberaba, MG, 2004/2005.

Espécie	Título*
	100	200	400	800
Total	6	3	4	4
% Reagentes	35,3	17,64	23,53	23,53
Cerdocyon thous	0	1	0	0
Chrysocyon brachyurus	0	1	0	0
Geochelone spp.	1	0	0	0
Leopardus pardalis	2	0	0	0
Oreochromis niloticus	0	0	2	4
Puma concolor	0	1	1	0
Rattus rattus	0	0	1	0
Tayassu tajacu	2	0	0	0
Trachemys scripta	1	0	0	0

• ^*
  recíproca da maior diluição do soro com 50% de aglutinação

A titulação para anticorpos anti-leptospiras teve ampla variabilidade, sendo de 100 a 800 onde o título 100 foi o mais prevalente entre as espécies reagentes. Conforme observado na Tabela 3.

DISCUSSÃO

Dados da literatura mostram uma quantidade maior de estudos da leptospirose em animais silvestres de vida livre do que para animais mantidos em cativeiro (LUNA-ALVARES et al., 1996). No entanto, poucos estudos evidenciam a presença da leptospirose acometendo populações cativas, relatando óbito em primatas (SHIVE et al., 1969; SÁ et al., 1999), guanaco (HODGIN et al., 1984) e ariranhas (FARIAS et al., 1999).

Na família Canidae, dos 5 animais analisados neste estudo, um cachorro-do-mato (Cerdocyon thous) foi positivo para o sorovar Grippotyphosa (01/01; 100%) e o único lobo-guará (Chrysocyon brachyurus) também foi reagente para o sorovar Canicola e os dois canídeos da espécie Lycalopex vetulus foram negativos. Ao comparar os resultados do presente estudo com o estudo de CORRÊA (2004) verifica-se que a mesma espécie monstrou a ocorrência dos sorovares Butembo e Cynopteri em Cerdocyon thous, no entanto, GUERRA-NETO et al. (2002) não encontrou nenhum espécime reagente nos sete cachorros-do-mato testados.

A presença de anticorpos anti-Leptospira na espécie Chrysocyon brachyurus poderia ter relação com o óbito do mesmo espécime que habitava o mesmo recinto e veio a óbito quatro meses antes e os achados patológicos de nefrite intersticial e gastroenterite hemorrágica sugeriram leptospirose associada à salmonela. Em estudo retrospectivo de 30 anos realizado por DINIZ et al. (1999) com 100 animais desta espécie viventes em cativeiro no zoológico de São Paulo, puderam observar que dentre as principais enfermidades bacterianas prevalentes, a leptospirose estava incluída com 22,2% de ocorrência nos animais doentes, juntamente com a colibacilose e a salmonelose.

Na família felidae, entre os 9 animais examinados, 4 foram positivos (44,45%). Os sorovares encontrados foram Canicola, Icterohaemorrhagiae e Andamana. A infecção por Leptospira spp. em felinos é relatada com mais freqüência em gatos domésticos. MASON et al. (1972) relata dois casos suspeitos em gatos domésticos, com óbito e reação positiva para sorovares Pomona em um dos animais. LARSSON (1981) e DICKESON & LOVE (1993) em estudos epidemiológicos relatam a presença de diversos sorovares detectados em felinos domésticos.

Em felinos silvestres dados sobre leptospirose são ainda mais escassos. Neste estudo dos quatro felinos silvestres (Puma concolor) 2 animais foram positivos para o sorovar Icterohaemorrhagiae, sendo ambos provenientes do mesmo lugar, vivendo em ambiente igual e inclusive se alimentando em condições idênticas, dividindo o cativeiro, sugerindo comum fonte de infecção.

Para a espécie Jaguatirica (Leopardus pardalis) 2 das 3 (66,6%) espécies estudadas foram positivas sendo encontrado os sorovares Icterohaemorrhagiae e Canicola, conforme pode ser observado na (Tabela 2). No estudo das 7 Jaguatiricas (Leopardus pardalis) analisado por CORRÊA (2004), 7 delas foram reagentes para diferentes sorovares, havendo reação cruzada em todos os animais reagentes.

Na família Procyonidae, do único espécime testado esse foi não reagente e coincide com a literatura que não há relatos de infecção por Leptospira spp. nesta espécie.

Das espécies de répteis estudadas a Geochelone spp. com 16 animais examinados, apenas 1 foi positivo para o sorovar Andamana e também a espécie Trachemys scripta, 1 foi reagente para leptospira. Em répteis os estudos também são escassos, mas os trabalhos indicam que o sorovar mais freqüente é o Pomona e atinge mais ofídios e quelônios, normalmente pela ingestão do agente presente em presas infectadas. A infecção pode permanecer incubada por até seis meses e meio, e parece não haver sinais clínicos ou lesões patológicas, embora algumas vezes se encontren e frite intersticial (OLIVEIRA, 2003).

Dos 7 peixes examinados 6 (85,75%) foram reagentes para Leptospira spp. sorovar Canicola. Estudo sobre peixes é muito raro, porém DOUGLAS (1995) e LODAL & LUND (1989) relatam que as rações oferecidas aos peixes atraem roedores que contaminam os depósitos de ração com urina infectada, permitindo a transmissão da infecção para os peixes. Embora nada fosse realizado para elucidar a fonte de infecção destes animais, é provável que a via alimentar por contaminação da ração ou da água, no ambiente aquático onde eles vivem explique estes resultados. Dos 27 animais sinantrópicos analisados, capturados com armadilha própria para roedores (Rattus rattus), apenas 1 (3,0%) soropositivo, reagente para o sorovar Icterohaemorrhagiae. No estudo realizado por BEVILACQUA et al. (2004), dos 72 roedores de diversas espécies capturados no Hospital Veterinário Universitário na Zona da Mata, MG, não foram encontrados animais positivos para leptospirose através do teste Sorológico da Microaglutinação e da pesquisa histopatológica.

A mais importante fonte de infecção é o roedor, que pode exercer o papel de reservatório de leptospiras e, além de manter o agente, o dissemina por meio da urina no ambiente (FAINE, 1982; BENGIS et al., 2005).

A leptospirose é considerada tradicionalmente uma doença ocupacional com maior ocorrência em criadores de animais (BRASIL, 1995; NATARAJA SEENIVASAN et al., 2005). Alguns grupos profissionais correm grandes riscos de contrair a infecção devido ao freqüente contato com animais portadores, seus produtos e ainda ao próprio ambiente de trabalho. Dos 36 funcionários que realizaram teste para anticorpos antileptospira, nenhum foi reagente o que sugere que os Equipamentos de Proteção Individual (EPI), estejam adequados. Contudo, pode-se frisar que apesar de haver o sistema de rodízio entre os funcionários, eles não têm o mesmo grau de exposição ao risco.

Ao comparar os resultados encontrados neste estudo com os resultados dos trabalhos realizados por LUNA-ALVAREZ et al. (1996), CORRÊA et al. (2004) e GUERRA-NETO et al. (2002), parece evidente que os sorovares presentes, assim como a sua freqüência obedeçam mais aos sorovares de Leptospira prevalente em cativeiro da localidade onde se encontram os Zoológicos, do que das espécies animais ali alojadas.

A variedade de espécies animais soropositivas embora com poucos representantes por espécie, bem como os sorovares encontrados, indicam que a infecção por Leptospira spp. existe nos animais em cativeiro e pode se perpetuar neles sendo um potencial de disseminação da bactéria por meio da urina.

CONCLUSÕES

1. Dos 167 animais analisados, 17 foram positivos (9,82%) para leptospirose, pelo teste de Soroaglutinação Microscópica;

2. os sorovares mais freqüentes para o conjunto total foram: Patoc (01/17; 5,88%), Andamana (02/17; 11,76%), Grippotyphosa (01/17; 5 88%), Canicola (08/17; 47,05%) e Icterohaemorrhagiae (05/17; 29,415);

3. entre a ordem e família de animais silvestres examinados os sorovares mais encontrados foram: família Felidae e Canidae: Canicola e Icterohaemorrhagiae; ordem Reptilia: Andamana e Patoc; ordem Cephalochordata: Canicola; ordem Rodentia: Icterohaemorrhagiae;

4. os sorovares de maior proporção encontrado nos animais do Zoológico Municipal de Uberaba Parque do Jacarandá foram Canicola 8 (47,05%) animais, Icterohaemorrhagiae 5 (29,41%) animais e Andamana 2 (11,76%).

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  20 Abr 2022
• Data do Fascículo
  Jul-Sep 2005

Histórico

• Recebido
  05 Set 2005
• Aceito
  29 Set 2005