Regeneração de plantas híbridas entre Lycopersicon esculentum e L. peruvianum a partir de calos com dois anos de cultura in vitro

Regeneration of Lycopersicon esculentum X L. peruvianum hybrid plants from two year old callus culture

Resumos

Calos obtidos da cultura in vitro de embrião imaturo do cruzamento interespecífico L. esculentum x L. peruvianum, praticamente perderam a capacidade morfogenética, após dois anos de subcultura. Na tentativa de recuperação do processo de organogênese desses calos, realizaram-se dois experimentos, utilizando-se os fitorreguladores ácido indolacético (IAA) e 6-benziladenina (6-BA), cujas concentrações foram combinadas em dialélicos de 5 x 5 e 3 x 3. A composição de sais minerais e vitaminas baseou-se no meio de Murashige e Skoog, adicionando-se sacarose a 3% e ágar a 0,8%, e ajustando-se o pH final dos meios de cultura para 5,5. As condições para o dialélico 5 x 5 foram fotoperíodo de 16 horas de luz a 600 lux e temperatura de 25 ± 3°C. No dialélico 3 x 3, os tratamentos foram mantidos em câmara de crescimento a 2.000 lux, sob a mesma variação de temperatura e fotoperíodo. Em cada frasco, inoculou-se um calo com cerca de 1 cm³, totalizando quinze repetições. Avaliaram-se o desenvolvimento de calos, atribuindo-se uma escala de notas de 1 a 5, e a presença de plantas (organogênese) após 30 dias de cultura. Observou-se o número total de plantas por tratamento, bem como o desenvolvimento das plantas em centímetro. No dialélico 5 x 5, a organogênese foi apenas incipiente em três tratamentos, porém as melhores combinações para o desenvolvimento dos calos foram de 0,5, 2,5 e 5,0µM de IAA com 2,5µM de 6-BA. No dialélico 3 x 3, houve a indução de plantas em sete tratamentos, sendo mais eficientes 25 e 50µM de 6-BA, sem auxina. O tratamento de 0,5 e 10,0µM de IAA e 6-BA, respectivamente, permitiu simultaneamente o crescimento de calos e a regeneração de plantas. Nota-se a influência das condições ambientais de manutenção das culturas, principalmente da intensidade de luz.

cultura de tecidos; tomate; organogênese; híbrido interespecífico

I. BIOTECNIA E FISIOLOGIA DE PLANTAS

Regeneração de plantas híbridas entre Lycopersicon esculentum e L. peruvianum a partir de calos com dois anos de cultura in vitro¹

Regeneration of Lycopersicon esculentum X L. peruvianum hybrid plants from two year old callus culture

Walter José SiqueiraI, ²; Monique Ines Segeren FonsecaI, ³; Maro R. SondhalII, ³

^ISeção de Genética, Instituto Agronômico (IAC), Caixa Postal 28, 13.001 Campinas (SP)

^IISeção de Genética, IAC. Atualmente na DNA Plant Technology Corporation, Cinamminson, New Jersey, EUA

RESUMO

Calos obtidos da cultura in vitro de embrião imaturo do cruzamento interespecífico L. esculentum x L. peruvianum, praticamente perderam a capacidade morfogenética, após dois anos de subcultura. Na tentativa de recuperação do processo de organogênese desses calos, realizaram-se dois experimentos, utilizando-se os fitorreguladores ácido indolacético (IAA) e 6-benziladenina (6-BA), cujas concentrações foram combinadas em dialélicos de 5 x 5 e 3 x 3. A composição de sais minerais e vitaminas baseou-se no meio de Murashige e Skoog, adicionando-se sacarose a 3% e ágar a 0,8%, e ajustando-se o pH final dos meios de cultura para 5,5. As condições para o dialélico 5 x 5 foram fotoperíodo de 16 horas de luz a 600 lux e temperatura de 25 ± 3°C. No dialélico 3 x 3, os tratamentos foram mantidos em câmara de crescimento a 2.000 lux, sob a mesma variação de temperatura e fotoperíodo. Em cada frasco, inoculou-se um calo com cerca de 1 cm³, totalizando quinze repetições. Avaliaram-se o desenvolvimento de calos, atribuindo-se uma escala de notas de 1 a 5, e a presença de plantas (organogênese) após 30 dias de cultura. Observou-se o número total de plantas por tratamento, bem como o desenvolvimento das plantas em centímetro. No dialélico 5 x 5, a organogênese foi apenas incipiente em três tratamentos, porém as melhores combinações para o desenvolvimento dos calos foram de 0,5, 2,5 e 5,0µM de IAA com 2,5µM de 6-BA. No dialélico 3 x 3, houve a indução de plantas em sete tratamentos, sendo mais eficientes 25 e 50µM de 6-BA, sem auxina. O tratamento de 0,5 e 10,0µM de IAA e 6-BA, respectivamente, permitiu simultaneamente o crescimento de calos e a regeneração de plantas. Nota-se a influência das condições ambientais de manutenção das culturas, principalmente da intensidade de luz.

Termos de indexação: cultura de tecidos, tomate, organogênese, híbrido interespecífico.

SUMMARY

Callus from Lycopersicon esculentum x L. peruvianum interespecific hybrids cultured in vitro lost their morphogenetic abilities after two years. An attempt has been made to recover the organogenesis of those callus, using 5 x 5 and 3 x 3 diallelic combinations between indolacetic acid (IAA) and 6-benzyl-adenin (6-BA). Mineral salts and vitamins of the MS medium (Murashige & Skoog), were used, added with sucrose (3%) and agar (0.8%). Culture medium pH was kept at 5.5. The 5 x 5 diallelic treatments were incubated under the following conditions: day temperature = 25 ± 3°C; day length = 16 hours; light intensity = 600 lux. The 3 x 3 diallelic treatments were kept at the same conditions of daylight and temperature but at 2000 lux light intensity. Callus development and shoot formation were graded from 1 to 5, 30 days after inoculation, Shoot number and height were also evaluated. In the 5 x 5 diallelic experiment, it was observed a low number of differentiated plants. The best combinations for callus development have been 0.5, 2.5 and 5.0µM of IAA with 2.5µM of 6-BA, respectively. However in the 3 x 3 diallelic experiment, it was recorded a high frequency of shoot formation_s and the most efficient treatments were the 25.0 and 50.0µM concentrations of 6-BA, without any auxin. It was also observed the influence of environmental condi-tions (mainly light intensity) on the process.

Index terms: tissue culture, tomato, organogenesis, interspecific hybrid.

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Recebido para publicação em 30 de abril de 1987 e aceito em 14 de março de 1988.

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1

Trabalho apresentado na 37ª Reunião Anual da Sociedade Brasileira para o Progresso da Ciência (SBPC), realizado em Belo Horizonte, MG, no período de 10 a 17 de julho de 1985.

2

Com bolsa de pesquisa do CNPq.

3

Com bolsa de pesquisa da FAPESP.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  05 Dez 2007
• Data do Fascículo
  1988

Histórico

• Aceito
  14 Mar 1988
• Recebido
  30 Abr 1987