Ocorrência de Meloidogyne enterolobii em goiabeira no município de São Manuel, estado de São Paulo

A goiabeira (Psidium guajava L.), originária da América tropical (³), enfrenta declínio em sua produção desde o surgimento do nematoide Meloidogyne enterolobii. Em amostragem realizada em março de 2018, no município de São Manuel/SP, Brasil (22º 75′S, 48º ′W), foram observadas galhas nas raízes e bronzeamento arroxeado nas folhas de goiabeira (cultivar Paluma) (figuras 1A e 1B, respectivamente). O material foi levado ao Laboratório de Nematologia Agrícola da Faculdade de Ciências Agronômicas da Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, câmpus Botucatu- SP. As raízes foram processadas para extração dos nematoides de acordo com o método proposto por Coolen & D’Herde (²). Realizaram-se lâminas baixas para a observação dos juvenis em microscópio de luz e cortes da configuração perineal de fêmeas de Meloidogyne conforme a técnica de Taylor & Netscher (⁷). Observou-se a região do padrão perineal com o arco dorsal alto e arredondado e estrias finas. Constatou-se a presença de linha lateral única, que ocorre em um lado do padrão em junção dos arcos dorsal e ventral (figura 1C), esta também foi observada por Rammah & Hirschmann (⁶) quando realizaram a descrição original de Meloidogyne mayaguensis, que agora é considerado como sinonímia de M. enterolobii. O padrão perineal foi semelhante ao encontrado por Poornima et al. (⁵) em espécies de M. enterolobii parasitando goiabeira na Índia. Com a finalidade de confirmar a espécie do nematoide foi realizada extração do DNA genômico, de acordo com método adaptado por Carvalho et al. (¹). Foram utilizados primers específicos para o gênero Meloidogyne e visualizada banda em transiluminador de luz UV (Major Science). A amplificação utilizando os marcadores Me-F/Me-R foi positiva para M. enterolobii, gerando fragmento de 256 pb (⁴) (figura 1D). Posteriormente, o produto de PCR foi submetido à sequenciamento Sanger (ABI 3500, Applied Biosystems). A sequência obtida foi alinhada utilizando o programa Geneious e comparada com banco de dados (GenBank), mostrando semelhança de 97% com M. enterolobii (número de acesso MH800967.1).

Figura 1
A Galhas no sistema radicular causadas por M. enterolobii. B – Bronzeamento arroxeado nas folhas. C- Configuração da região perineal de M. enterolobii. D Gel de agarose 1%. MM: Marcador molecular 100 pb; 1: Positivo para M. enterolobii; 2: Negativo para Meloidogyne incognita; 3: Negativo para Meloidogyne javanica; 4: Negativo para Meloidogyne exigua; controle negativo utilizando água nuclease free.

REFERÊNCIAS

• ¹
  Carvalho, V.R.; Wilcken, S.R.S.; Wilcken, C.F.; Castro, B.M.C.; Soares, M.A.; Zanuncio, J.C. Technical and economic ef?ciency of methods for extracting genomic DNA from Meloidogyne javanica Journal of Microbiological Methods, Netherlands, v.157, p.108-112, 2018.
• ²
  Coolen, W.A.; D’Herde, C.J. A method for quantitative extration of nematodes from plant tissue Bélgica: State Nematology and Entomology Research Station, 1972.
• ³
  Lazan, H.; Ali, Z.M. Guava. In: Shaw, P.E.; Chan Jr., H.T.; Nagy, S. (ed.). Tropical and Subtropical Fruits Auburndale: AgScience, 1998, p.446-485.
• ⁴
  Long, H.; Liu, H.; Xu, J.H. Development of a PCR diagnostic for the rootknot nematode Meloidogyne enterolobii Acta Phytopathologica Sinica, China, v.36, n.2, p.109-115, 2006.
• ⁵
  Poornima, K.; Suresh, P.; Kalaiarasan, P.; Subramanian, S.; Ramaraju, K. Root Knot Nematode, Meloidogyne enterolobii in Guava (Psidium guajava L.) A New Record from India. Madras Agricultural Journal, Coimbatore, v.103, p.359-365, 2016.
• ⁶
  Rammah, A.; Hirschmann, H. Meloidogyne mayaguensis n.sp. (Meloidogynidae), a root knot nematode from Puerto Rico. Journal of Nematology, Lawrence, v.20, n.1, p.58-69, 1988.
• ⁷
  Taylor, D.P.; Netscher, C. An improved technique for preparing perineal patterns of Meloidogyne spp. Nematologica, Wagheningen, v.20, p.268-269, 1974.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  15 Jan 2021
• Data do Fascículo
  Oct-Dec 2020

Histórico

• Recebido
  11 Jun 2020
• Aceito
  20 Ago 2020