Heterozigose para hemoglobinopatias em doadores de sangue do Centro de Hemoterapia de Sergipe

Heterozigosity to hemoglobinopathies in blood donors from the Hemotherapy Center in Sergipe, NE-Brazil

ARTIGO

Heterozigose para hemoglobinopatias em doadores de sangue do Centro de Hemoterapia de Sergipe

Heterozigosity to hemoglobinopathies in blood donors from the Hemotherapy Center in Sergipe, NE-Brazil

Wanessa L. P. Vivas^I; Danilo S. Rebouças^II; Amaury L. D. Fabbro^III; Rosana Cipolotti^IV

^IBiomédica, mestre em Ciências da Saúde pela Universidade Federal de Sergipe

^IIDoutorando em Medicina, bolsista PIBIC-CNPq

^IIIMédico, doutor em Medicina (Medicina Social), professor-adjunto do Departamento de Medicina Social da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto-USP

^IVMédica, doutora em Medicina (Pediatria), professora-adjunta da Universidade Federal de Sergipe

^{Correspondência}

RESUMO

As hemoglobinopatias, distúrbios geneticamente determinados da hemoglobina (Hb) humana, estão presentes com freqüência elevada em várias partes do mundo, sendo que no Brasil as Hb anormais S e C são as mais prevalentes. Com o objetivo de identificar a presença de portadores saudáveis de genes para hemoglobinopatias entre doadores de sangue do Centro de Hemoterapia do Estado de Sergipe (Hemose), foram analisadas 1.345 amostras de doadores de sangue. Em todas as amostras foram realizados eritrograma automatizado e eletroforese de hemoglobina em acetato de celulose utilizando-se tampão Tris-EDTA-Borato pH 8,6. As amostras que apresentaram hemoglobinas anormais foram submetidas a teste de falcização, teste de solubilidade e Cromatografia Líquida de Alta Performance (HPLC). Foram identificadas 76 amostras com hemoglobinas anormais (5,6%), das quais 55 (4,1%) com traço falciforme (Hb AS), 19 (1,4%) com Hb AC, uma com Hb AD e outra sugestiva de beta-talassemia. Os resultados encontrados demonstram a necessidade de implantação da triagem para hemoglobinopatias entre doadores de sangue, pois desta maneira o receptor de sangue é beneficiado com produto de melhor qualidade, e o doador com a identificação de uma alteração genética que pode vir a se manifestar em seus descendentes. Rev. bras. hematol. hemoter. 2006;28(4):284-287.

Palavras-chave: Traço falciforme; doadores de sangue; Hemoglobina S.

ABSTRACT

Hemoglobinopathies are genetically determined disorders that present in significant high frequencies in certain parts of the world. Despite of the existence of hundreds of known hereditary hemoglobinopathies, Brazilian studies have demonstrated that abnormal hemoglobins S and C are the most prevalent. With the objective of identifying the profile of hemoglobinopathies of blood donors at the Hemotherapy Center in the State of Sergipe (Hemose), 1345 samples of blood were analyzed. Initially automatic blood testing and electrophoreses in cellulose acetate using a Tris-EDTA-Borate buffer at pH 8.6 were carried out for all samples. Samples that presented with abnormal hemoglobins were submitted to testing for the sickle cell trait, solubility test and by High Performance Liquid Chromatography. Seventy-six samples (5.6%) with abnormal hemoglobins were identified, 55 (4.1%) of which had the sickle cell trait (Hb AS), 19 (1.4%) had Hb AC, 1 (0.1%) had Hb AD and 1 (0.1%) was suggestive for beta- thalassaemia. The results demonstrate a necessity for the implantation of screening of hemoglobinopathies in blood donors, so that blood recipients benefit from good quality blood and donors from the diagnoses of genetic alterations that may be prevented in descendants. 2006;28(4):284-287.

Key words: Sickle cell trait; blood donor; Hemoglobin S.

Introdução

Os distúrbios da hemoglobina (Hb) humana ocorrem em freqüência significativa em todos os continentes. Milhões de pessoas carregam genes para hemoglobinas anormais em várias combinações, com conseqüências que variam de quase imperceptíveis a letais.¹ Apesar da existência de centenas de hemoglobinopatias hereditárias conhecidas, são três as que representam problema de saúde pública no Brasil: as hemoglobinopatias S e C e a talassemia beta, sendo suas respectivas prevalências na população geral 6%, 1% e 5%. Enquanto as duas primeiras, pela sua alta freqüência entre afro-descendentes, apresentam importância nacional, a talassemia beta encontra-se mais freqüentemente entre os descendentes de europeus, especialmente oriundos da região do mar Mediterrâneo, e é mais encontrada nas regiões Sul e Sudeste do Brasil. ²

Estudos entre doadores de sangue mostram que a prevalência do traço falciforme é maior nos estados da região Nordeste, porém é encontrada em todas as regiões brasileiras, e, por isso, a doença falciforme (DF) é considerada uma das doenças genéticas mais importantes no cenário epidemiológico brasileiro.³

Sabe-se que a transfusão de hemácias contendo hemoglobina A (Hb A) e hemoglobina S (Hb S) possui algumas contra-indicações bem específicas, como em transfusão em recém-nascidos (sobretudo em prematuros), em pacientes com anemia falciforme em crises de falcização e em indivíduos com hipóxia intensa.⁴ Desde 2002 existe no Brasil a recomendação para detecção de Hb S em doadores de sangue. A legislação atual^5,6 torna obrigatória a investigação de outras hemoglobinas anormais no sangue de todos os doadores. As bolsas contendo sangue com Hb S não devem ser descartadas, mas proibida a transfusão destes componentes em pacientes com hemoglobinopatias, recém-nascidos, pacientes com acidose grave e em transfusão intra-uterina.^7-23

O presente estudo objetivou identificar portadores saudáveis de genes para hemoglobinopatias entre doadores de sangue do Centro de Hemoterapia de Sergipe (Hemose).

Casuística e Métodos

Sergipe se localiza na região Nordeste do Brasil e possui 1.903.065 habitantes. O Hemose é o único centro de captação de sangue e distribuição de hemoderivados do estado de Sergipe, recebendo cerca de 2.000 doações por mês. Conforme rotina do Hemose, os potenciais doadores com hemoglobina abaixo de 12 mg/dl não são encaminhados para doação. Foi realizado um estudo transversal de setembro de 2004 a junho de 2005 analisando-se amostras de sangue de 1.345 doadores.

A seleção dos participantes foi aleatória. Durante a coleta da amostra eram anotados o gênero, idade e cor da pele.

O eritrograma automatizado foi realizado em todas as amostras, que em seguida foram lisadas com saponina a 1% para a realização da eletroforese alcalina em pH 8,6 com tampão Tris-EDTA-Borato.²⁴ As amostras que apresentaram hemoglobinas anormais foram submetidas ao teste de falcização, teste de solubilidade e Cromatografia Líquida de Alta Performance (HPLC).

O projeto deste estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa envolvendo seres humanos da Universidade Federal de Sergipe em 3 de setembro de 2004. Os resultados foram analisados através de distribuição de freqüências, teste exato de Fisher e teste Qui-Quadrado usando software Epi Info (versão 6.04B).

Resultados

Foram estudadas amostras de sangue de 1.345 doadores, dos quais 85% eram do gênero masculino. Foram positivas para hemoglobinopatias 76 (5,6%) das amostras, sendo 55 (4,1%) AS, 19 (1,4%) AC, 1 (0,1%) AD e 1 (0,1%) sugestivo de beta-talassemia (Figura 1). Doadores portadores de Hb AS correspondem a 73% e os Hb AC a 25% dos portadores de hemoglobinopatias.

Não houve diferença estatisticamente significativa entre as médias de número de hemácias (Hm), dosagem de hemoglobina (Hb), hematócrito (Htc) e hemoglobina corpuscular média (HCM) nos portadores de hemoglobinopatias em relação aos não portadores. Porém, entre as médias de volume corpuscular médio (VCM) e concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM), houve diferença entre os portadores de hemoglobinopatias em relação aos não portadores (Tabela 1).

Foi utilizada a técnica de cromatografia líquida de alta performance (HPLC) para a obtenção dos valores das frações de hemoglobina dos 76 doadores que apresentaram positividade para alguma hemoglobinopatia (Tabela 2).

O teste de solubilidade apresentou-se como um bom discriminador entre doadores normais e com hemoglobinopatias, sendo positivo em 72% das amostras com hemoglobinopatias e em nenhuma amostra com Hb AA (p<0.001). O teste de falcização foi positivo em 23% das amostras com hemoglobinopatias e em nenhuma amostra com Hb AA (p<0.001).

Discussão

O Brasil caracteriza-se por significativa mistura racial, com grande influência na dispersão de genes anormais, notadamente falcemias e talassemias. A distribuição das hemoglobinas normais está relacionada com os grupos raciais que participaram na formação da população de cada região.¹⁸

Assim, a heterogeneidade étnica da população brasileira, além de variações técnicas, dificulta a comparação dos resultados. No entanto, a Hb S está presente e foi a mais freqüente hemoglobinopatia nesse e em outros estudos. Existe, naturalmente, uma relação com o contingente de africanos que povoaram as diversas regiões.²⁵

A presença de hemácias contendo Hb S em doadores de sangue brasileiros é representativa, chegando a 2,4% caracterizando a necessidade potencial da sua detecção laboratorial a nível de triagem. A transfusão destas hemácias pode resultar em efeitos indesejáveis, tanto pela possibilidade de falcização no receptor, como pelas alterações do produto hemoterápico durante o processamento e estocagem.²³

Os dados obtidos pela eletroforese de hemoglobina, teste de falcização, teste de solubilidade e HPLC indicam que 5,6% dos doadores de sangue do Centro de Hemoterapia de Sergipe são portadores assintomáticos de hemoglobinopatias, sendo 4,1% de Hb AS, 1,4% de Hb AC, 0,1% de Hb AD e 0,1% sugestivo de beta-talassemia. Esses resultados, encontrados entre doadores de sangue em Sergipe são compatíveis aos relatados por Naoum, que mostrou que a prevalência do traço falciforme entre os doadores de sangue é maior nos estados do Nordeste, como a Bahia (5,5%),²⁶ e por Gomes, em Alagoas (2,06%).²⁷

No estudo feito por Melo et al (2000) em 23.981 doadores de sangue de Uberlândia, Minas Gerais, e cidades subjacentes, os autores encontraram 820 (3,42%) portadores de hemoglobinopatias, onde a Hb AS foi encontrada em maior prevalência (2,48%) quando comparadas com as outras hemoglobinopatias; o mesmo fato foi encontrado em feito por Tavares e Bernardes²² em 483 doadores de sangue do Centro de Hematologia de Sobradinho (Distrito Federal), em que a freqüência de Hb AS foi a predominante (2,96%), e no Hemonúcleo da Universidade São Francisco, na cidade de Bragança Paulista, São Paulo, onde foi realizado um estudo em 1.846 doadores; desses 1,13% foi Hb AS, demonstrando predominância de doadores AS em bancos de sangue do Brasil.²⁰

Nas regiões Sul e Sudeste foi observado 1,9% de hemoglobinopatias, com predomínio de talassemias²⁸ em São Paulo e 11,7% no Rio Grande do Sul, sendo 9,8% sugestivos de talassemia.²⁹ A baixa prevalência de talassemias no presente estudo (0,1%) se justifica porque a seleção prévia dos doadores exclui indivíduos anêmicos, além da presumida composição étnica da população.

Neste trabalho verificou-se que se as Hb variantes não puderam ser identificadas apenas pelos métodos eletroforéticos usuais, os quais diferenciaram bem os doadores normais em relação aos que apresentaram algum tipo de hemoglobinopatia. Foi necessária utilização de outras técnicas como o teste de solubilidade e teste de falcização para confirmação principalmente da Hb S. Evidenciou-se a dificuldade de interpretação das Hb variantes, principalmente daquelas que migraram em posição semelhante à Hb S em pH alcalino e que poderiam ter sido identificadas incorretamente.

Este estudo indica a necessidade da identificação de hemoglobinas anormais nos doadores de sangue do Hemose, objetivando a melhor qualidade do produto para o receptor e a orientação em saúde para o doador. Sugere-se que amostras sejam triadas através do VCM e da eletroforese de hemoglobina em pH alcalino, e posteriormente submetidas à HPLC.

Recebido: 18/05/2006

Aceito: 27/06/2006

Instituições: Universidade Federal de Sergipe e Hemocentro de Sergipe

Avaliação: Editor e dois revisores externos

Conflito de interesse: não há.

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  12 Jul 2007
• Data do Fascículo
  Dez 2006

Histórico

• Recebido
  18 Maio 2006
• Aceito
  27 Jun 2006