Resumos
O objetivo da pesquisa, visando otimizar a criação de Ageniaspis citricola Logvinovskaya (Hymenoptera: Encyrtidae) em laboratório, foi estudar a capacidade de parasitismo e desenvolvimento do parasitóide a 20, 25 e 30°C. Em testes de livre escolha e confinamento o parasitismo foi semelhante em ovos ou lagartas de 1º ínstar de Phyllocnistis citrella Stainton. A capacidade de parasitismo foi semelhante nas três temperaturas, embora tenha havido diferenças nos outros parâmetros principalmente quanto à duração do período ovo-adulto, que foi 23,6 dias a 20°C, 18,1 dias a 25°C e 13,8 dias a 30°C. A temperatura de 25°C foi a mais adequada para criação do inseto em laboratório, por proporcionar maior sobrevivência, e produzir maior número de pupas por ovo parasitado. Embora a 20°C os resultados tenham sido muito próximos, não se recomenda tal temperatura, pois nesta condição há um alongamento do ciclo e, conseqüentemente, menor número de indivíduos produzidos.
Insecta; criação de parasitóides; lagarta minadora-dos-citros; parasitóide de ovos
In order to optimize rearing of Ageniaspis citricola Logvinovskaya (Hymenoptera: Encyrtidae) in laboratory the parasitism capacity of the parasitoid was evaluated at 20, 25 and 30°C. After determining that the parasitism was similar in eggs and 1st-instar larvae of Phyllocnistis citrella Stainton in free-choice and no choice tests, the study of the development of the parasitoid on eggs was preferred for the readiness of acquiring and handling this stage of the parasitoid development. The parasitism capacity was similar at all three temperatures, although differences occurred in the other parameters especially the duration of the egg-adult period (23.6 days to 20°C, 18.1 days to 25°C and 13.8 days to 30°C), decreasing with the thermal elevation. However, considering the aim of this work, the 25°C temperature is more adequate for rearing the insect in laboratory for providing higher survival and produced a higher number of pupae per parasitized egg. Although the results at 20°C were very close, such temperature is not recommended because the cycle is extended with a consequent lower number of individuals produced.
Insecta; parasitoid rearing; citrus leaf miner; egg parasitoid
BIOLOGICAL CONTROL
Influência de três temperaturas na biologia e na capacidade de parasitismo de Ageniaspis citricola Logvinovskaya (Hymenoptera: Encyrtidae) em laboratório
Influence of three temperatures on the biology and parasitism capacity of Ageniaspis citricola Logvinovskaya (Hymenoptera: Encyrtidae) in laboratory
Patrícia Milano; José R.P. Parra
Depto. Entomologia, Fitopatologia e Zoologia Agrícola, ESALQ/USP, 13418-900, Piracicaba, SP
RESUMO
O objetivo da pesquisa, visando otimizar a criação de Ageniaspis citricola Logvinovskaya (Hymenoptera: Encyrtidae) em laboratório, foi estudar a capacidade de parasitismo e desenvolvimento do parasitóide a 20, 25 e 30ºC. Em testes de livre escolha e confinamento o parasitismo foi semelhante em ovos ou lagartas de 1o ínstar de Phyllocnistis citrella Stainton. A capacidade de parasitismo foi semelhante nas três temperaturas, embora tenha havido diferenças nos outros parâmetros principalmente quanto à duração do período ovo-adulto, que foi 23,6 dias a 20ºC, 18,1 dias a 25ºC e 13,8 dias a 30ºC. A temperatura de 25ºC foi a mais adequada para criação do inseto em laboratório, por proporcionar maior sobrevivência, e produzir maior número de pupas por ovo parasitado. Embora a 20ºC os resultados tenham sido muito próximos, não se recomenda tal temperatura, pois nesta condição há um alongamento do ciclo e, conseqüentemente, menor número de indivíduos produzidos.
Palavras-chave: Insecta, criação de parasitóides, lagarta minadora-dos-citros, parasitóide de ovos
ABSTRACT
In order to optimize rearing of Ageniaspis citricola Logvinovskaya (Hymenoptera: Encyrtidae) in laboratory the parasitism capacity of the parasitoid was evaluated at 20, 25 and 30ºC. After determining that the parasitism was similar in eggs and 1st-instar larvae of Phyllocnistis citrella Stainton in free-choice and no choice tests, the study of the development of the parasitoid on eggs was preferred for the readiness of acquiring and handling this stage of the parasitoid development. The parasitism capacity was similar at all three temperatures, although differences occurred in the other parameters especially the duration of the egg-adult period (23.6 days to 20ºC, 18.1 days to 25ºC and 13.8 days to 30ºC), decreasing with the thermal elevation. However, considering the aim of this work, the 25°C temperature is more adequate for rearing the insect in laboratory for providing higher survival and produced a higher number of pupae per parasitized egg. Although the results at 20°C were very close, such temperature is not recommended because the cycle is extended with a consequent lower number of individuals produced.
Key words: Insecta, parasitoid rearing, citrus leaf miner, egg parasitoid
O microimenóptero Ageniaspis citricola Logvinovskaya foi inicialmente descrito através de populações oriundas do Vietnã (Logvinovskaya 1983), ocorrendo também em Taiwan e Tailândia (Schauff et al. 1998). Atualmente, devido à sua utilização como agente de controle de Phyllocnistis citrella Stainton (Lepidoptera: Gracillariidae), encontra-se distribuído por vários países como: Austrália, Bahamas, Grécia, Honduras, Israel, Marrocos, Oman, Síria, Tunísia, Turquia, EUA (Flórida e Louisiana) (Schauff et al. 1998), Espanha (Garijo & Garcia 1994; Urbaneja et al. 1998), Argentina (Willink et al. 1998), Peru, Chile (Sacarías & Canales 1999) e Brasil (Gravena 2001).
O parasitóide é poliembriônico (Logvinovskaya 1983) e tem tido grande capacidade de adaptação nos locais onde foi utilizado como agente de controle biológico. Os índices de parasitismo, após seu estabelecimento em campo, têm sido da ordem de 60% a 80% nos EUA (Hoy et al. 1995) e de até 98% no Peru (Sacarias & Canales 1999). Em nosso país A.citricola foi introduzido em 1998, a partir de populações oriundas da Flórida (EUA), tendo grande adaptação nas regiões citrícolas do estado de São Paulo (Chagas et al. 2002) principalmente nas regiões mais úmidas. Dada a sua eficiência no controle de P. citrella, ele continua a ser liberado nas áreas onde o problema da praga não foi solucionado.
Assim, o objetivo deste trabalho foi o de otimizar a criação de A. citricola, estudando-se a biologia e a capacidade de parasitismo do parasitóide a 20, 25 e 30oC.
Material e Métodos
O trabalho foi desenvolvido no Laboratório de Biologia de Insetos do Departamento de Entomologia, Fitopatologia e Zoologia Agrícola da Escola Superior de Agricultura "Luiz de Queiroz" (ESALQ), Piracicaba, da Universidade de São Paulo (USP).
Criação Estoque da Praga e do Inimigo Natural. Populações de A. citricola foram mantidas em laboratório a 25 ± 2oC, UR 70 ± 10% e fotofase de 14h sobre P. citrella, utilizando-se a metodologia de criação do minador-dos-citros desenvolvida por Chagas & Parra (2000).
Parasitismo de A. citricola sobre Ovos e Lagartas de 1o Ínstar de P. citrella. Para obtenção de ovos e lagartas de 1o ínstar de P. citrella, 100 plantas de limão cravo (Citrus limonia L. Obseck) mantidas em tubetes, foram colocadas em gaiolas de madeira, com 60 cm de aresta, com dois casais de P. citrella por planta, durante 48h. Ao ser constatado o número de 300 ovos em um número de plantas que variou entre 40 e 60, estas foram separadas para a realização dos testes. Os ovos e as lagartas de 1o ínstar foram separados com o auxílio de microscópio estereoscópico, e expostos ao parasitismo a 33 fêmeas de A. citricola em testes de livre escolha e confinamento (Lara 1991) durante 48h. Os testes foram conduzidos em gaiolas de madeira, de 60 cm de aresta, recobertas por tela anti-afídeos, de coloração branca, com a parte frontal de vidro. Após a realização dos testes, as plantas contendo ovos e lagartas de 1o ínstar, foram mantidas a 25 ± 2oC, UR: 70 ± 10% e fotofase 14h. No 14o dia, ramos de limão cravo foram cortados, e cada câmara pupal do minador foi aberta, observando-se a presença ou não do parasitóide. O delineamento experimental foi totalmente ao acaso com cinco repetições para os testes de livre escolha e de confinamento. Os resultados foram transformados em 
e submetidos à análise de variância, sendo as médias comparadas pelo teste de Tukey, ao nível de 5% de probabilidade.
Influência de Três Temperaturas na Capacidade de Parasitismo e Biologia de A. citricola. Desde que não houve diferenças no parasitismo de ovos e lagartas de 1o ínstar de P. citrella, optou-se pela utilização de ovos para a avaliação do efeito das três temperaturas no desenvolvimento de A. citricola. O bioensaio foi conduzido em gaiolas constituídas de material plástico, cilíndrico, de 9,5 cm de altura, cuja base menor, mediu 7,8 cm de diâmetro e a maior 9,8 cm, onde se acoplou uma tampa de 10,5 cm de diâmetro. Nas paredes e na base menor do recipiente, foram feitas quatro aberturas circulares, de 2,8 cm de diâmetro, recobertas por tecido voile, para permitir a aeração. Na tampa, foi realizado um corte de raio 5,5 cm cuja extremidade, no centro da tampa, terminou em um pequeno circulo de 0,8 cm de diâmetro. Assim, a tampa pôde ser aberta e acoplada ao caule de uma planta de limão cravo, a qual foi fixada à mesma, com o auxílio de pequenos pedaços de fita adesiva, os quais impediram a fuga dos insetos (Fig. 1A). A gaiola, por sua vez, foi acoplada à tampa, confinando o inseto (Fig. 1B). Plantas contendo vinte ovos de P. citrella foram diariamente oferecidas às fêmeas de A. citricola, nas temperaturas de 20, 25 e 30oC, até a morte das mesmas, no total de 22 fêmeas por tratamento. Na troca diária de plantas, o parasitóide foi confinado em um pequeno tubo de ensaio e recolocado, posteriormente, na gaiola com a nova planta. Após o período de exposição às fêmeas, as plantas contendo os ovos, foram mantidas em grades de metal, em bandejas com água, em suas respectivas temperaturas. Observações biológicas diárias foram realizadas até a formação de pupas do parasitóide, quando então, as folhas contendo as pupas foram acondicionadas em tubos de vidro de 8,5 cm de altura e 2,3 cm de diâmetro, contendo três retângulos de papel de filtro de 7 cm x 1 cm, a fim de se manter a umidade nas respectivas temperaturas.
Avaliaram-se, em cada temperatura, a porcentagem de parasitismo, longevidade e sobrevivência, média de pupas de A. citricola por hospedeiro, viabilidade pupal e duração do período ovo-adulto do parasitóide. Os resultados de capacidade de parasitismo e longevidade das fêmeas foram transformados em e submetidos a análise de variância e as médias, comparadas pelo teste de Tukey, a 5% de probabilidade. A sobrevivência de A. citricola foi analisada pelo modelo de distribuição de Weibull (Sgrillo 1982).
Como o objetivo desta pesquisa foi determinar a melhor temperatura para otimizar a criação do parasitóide, estimou-se o número de gerações, durante um ano, de A. citricola levando-se em conta a duração do período ovo-adulto. Calculou-se o número de insetos produzidos por temperatura/fêmea durante um ano, com base no número de pupas produzidas e na sua viabilidade, durante as gerações possíveis.
Resultados e Discussão
Parasitismo de A.citricola em Ovos e Lagartas de 1o Ínstar de P. citrella. O parasitismo médio foi baixo, tanto sobre ovos (19,3 ± 11,01% e 29,6 ± 13,14%) como sobre lagartas de 1o ínstar (16,2 ± 7,47% e 34,5 ± 12,54%), para ambos, em teste de livre escolha e confinamento, respectivamente, considerando-se o número de ovos e lagartas oferecidos (300/repetição). O baixo parasitismo pode ter sido conseqüência da mortalidade de A. citricola durante seu desenvolvimento, fato não estudado no presente trabalho, sugerindo-se pesquisas neste sentido. Como não houve diferenças estatísticas entre o parasitismo de ovos e de lagartas de 1o ínstar, optou-se por oferecer ovos de P. citrella, devido à facilidade e rapidez na obtenção dos mesmos. A. citricola é poliembriônico (Logvinovskaya 1983, Edwards & Hoy 1998), e nos dois testes (confinamento e livre escolha) formaram-se de uma a seis pupas do parasitóide, não havendo diferenças numéricas no parasitismo de ovos ou lagartas de 1o ínstar de P. citrella.
Influência de Três Temperaturas na Capacidade de Parasitismo e Biologia de A. citricola. A temperatura não afetou a capacidade de parasitismo de A. citricola, a qual variou de 20,2% a 26,0% a 20oC e 30oC (Tabela 1), bem como a longevidade média das fêmeas. Por outro lado, a longevidade média de A. citricola a 25oC (Tabela 1) foi superior àquelas encontrada por Smith e Hoy (1995) e por Argov & Rössler (1996,1998), o mesmo ocorrendo em relação à temperatura de 30oC, onde a longevidade média foi superior àquela encontrada por Hoy & Nguyen (1997) e Edwards & Hoy (1998). Estes últimos autores observaram a 30oC e em umidades de 96, 80, 63 e 30%, a máxima longevidade de quatro dias em UR de 96% e longevidade menor do que 24h em umidades inferiores. A umidade afetou a longevidade dos adultos no trabalho realizado por Edwards & Hoy (1998), sendo que no presente trabalho, a UR não foi levada em consideração, pois utilizou-se a melhor UR para a espécie (70 ± 10%), determinada por M.C.M. Chagas (informação pessoal).
Embora para a longevidade média das fêmeas não tenha ocorrido influência da temperatura, a sobrevivência esperada, através do modelo de weibull, foi maior nas temperaturas de 20oC e 25oC, variando de 19 a 18 dias respectivamente. A 30oC, a sobrevivência das fêmeas não ultrapassou oito dias (Fig. 2). A média de pupas por hospedeiro foi maior a 25oC e menor a 30oC variando de 5,6 a 3,9 pupas, respectivamente (Tabela 2). Foram observadas de uma a sete pupas de A. citricola por hospedeiro em todas as temperaturas testadas; no entanto, a porcentagem de ocorrência de duas pupas foi a mais comum, sendo registrada em 43,6% dos casos (Tabela 3).
A viabilidade pupal foi maior a 20oC em relação às outras temperaturas, sendo de 58,4%, diferindo dos valores obtidos a 25oC (43,9%) e a 30oC (32,3%) (Tabela 2). A duração do período ovo-adulto decresceu com o aumento da temperatura sendo de 23,6 dias a 20oC, de 18,1 dias a 25oC e de 13,8 dias a 30oC (Tabela 2).
Durante uma geração de laboratório de A. citricola, a longevidade das fêmeas foi estatisticamente semelhante nas três temperaturas (Tabela 1); por outro lado, a viabilidade pupal foi maior a 20oC (Tabela 2), sendo o número de pupas produzido semelhante a 20oC e 25oC (Tabela 2). Entretanto para grandes criações (objetivo do presente trabalho), o número estimado de adultos produzidos durante um ano na temperatura de 25oC é 25,9% maior em relação ao obtido a 20oC e 35,7% superior ao obtido a 30oC (Tabela 4). Assim, indica-se a temperatura de 25oC como a mais adequada para a criação continua do parasitóide A. citricola em laboratório.
Agradecimentos
A Rita de Cássia R.G. Gervásio e Ronaldo Reis, do Departamento de Entomologia, Fitopatologia e Zoologia Agrícola da ESALQ/USP, pelo auxílio nas análises estatísticas. À Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (Capes), pela bolsa de pesquisa para o primeiro autor. Ao Fundo de Defesa da Citricultura (Fundecitrus), pelo suporte financeiro e apoio logístico.
Literatura Citada
Received 22/01/02
Accepted 23/05/03
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Datas de Publicação
-
Publicação nesta coleção
11 Nov 2003 -
Data do Fascículo
Jun 2003
Histórico
-
Aceito
23 Maio 2003 -
Recebido
22 Jan 2002
