TÉCNICAS PARA AVALIAÇÃO DO EFEITO “IN VITRO” DE FUNGICIDAS SOBRE BACILLUS THURINGIENSIS VAR. KURSTAKI

Silva, E.R.L.; Alves, L.F.A.; Sene, L.; Santos, J.; Bonini, A.K.; Potrich, M.; Neves, P.M.O.J.

doi:10.1590/1808-1657v73p4292006

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Sumário

Artigo Científico • Arq. Inst. Biol. 73 (4) • Oct-Dec 2006 • https://doi.org/10.1590/1808-1657v73p4292006 copiar

TÉCNICAS PARA AVALIAÇÃO DO EFEITO “IN VITRO” DE FUNGICIDAS SOBRE BACILLUS THURINGIENSIS VAR. KURSTAKI^* * Parte da dissertação de mestrado do primeiro autor - Universidade Estadual do Oeste do Paraná, Unioeste,Campus de Marechal Cândido Rondon.

TECHNIQUES FOR EVALUATION OF THE IN-VITRO EFFECT OF FUNGICIDES ON BACILLUS THURINGIENSIS VAR. KURSTAKI

Autoria SCIMAGO INSTITUTIONS RANKINGS

RESUMO

Objetivou-se comparar técnicas para a avaliação “in vitro” do efeito de fungicidas sobre Bacillus thuringiensis var. kurstaki (Btk). Foram testados os fungicidas epoxiconazole, fentin hidróxido, azoxystrobin, tebuconazole e carbendazin em duas concentrações, sobre células e esporos, em ágar nutriente (AN)-sólido (MS) e caldo nutriente (CN)-líquido (ML), além da metabolização (MT) destes por Btk. Para células em AN, os fungicidas foram testados incorporados ao meio e em discos de papel-filtro. Avaliou-se, respectivamente, as UFC/mL e a formação de halo de inibição. Para células, a mistura Bt + produtos + CN foi incubada em erlemmeyers (30 ± 2° C, 150 rpm, 24h), e em seguida, diluida e inoculada em AN, avaliandose o número de UFC/mL. Os testes de MT e esporos foram realizados em líquido (água). O efeito dos produtos variou conforme a concentração, técnica, tempo de contato e fase/estágio do desenvolvimento do patógeno. O teste ML é o mais indicado para a avaliação do efeito em células, sendo observado que a maioria dos fungicidas mostrou-se compatível com as mesmas, e apenas epoxiconazole e azoxystrobin foram metabolizados. Fentin hidróxido foi o único incompatível com esporos.

PALAVRAS-CHAVE
Bactérias entomopatogênicas; seletividade; compatibilidade

Nome		Formulação	Grupo químico	Concentração Recomendada L/ha¹ 1 Diluição padronizada em 200L H2O/há.
Técnico	Comercial
Fentin Hidróxido	Brestanid	SC	Organoestânico	0,5
Carbendazin	Derosal	SC	Benzimidazólico	0,5
Tebuconazole	Folicur	CE	Triazol	0,5
Epoxiconazole	Opera	SE	Estrobilurinas e triazol	0,5
Azoxystrobin	Priori	SC	Estrobilurinas	0,4

Tratamentos	Conc. L/ha¹ 1 Concentração utilizada dos produtos: R = recomendada, ½ R = metade da recomendada.	Média UFC/mL	% Relação à	Dif. Inóc. Inic.⁴ 4 Diferença do inóculo inicial = [(Média de UFC/mL do patógeno inoculada antes da incubação nos frascos Erlenmeyer)
		(×10⁶)	Testemunha² 2 Fórmula: [(Média de UFC/mL do tratamento/ Média de UFC/mL da testemunha × 100) – 100], sendo os valores positivos para aumento de UFC e negativos para a redução em relação à testemunha.	(×10⁶) UFC/ mL
CV (%)		17,37
Testemunha	^__ - (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para crescimento da bactéria (aumento de UFC) e negativos para morte da bactéria (diminuição das UFC) em relação ao inóculo inicial.	11,6 ± 0,57 a	^__ - (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para crescimento da bactéria (aumento de UFC) e negativos para morte da bactéria (diminuição das UFC) em relação ao inóculo inicial.	- 5,4
Carbendazin	0,25 (½ R)	10,4 ± 0,99 a	- 10,3	- 6,6
Carbendazin	0,5 (R)	6,4 ± 0,49 b	- 44,8	- 10,6
Epoxiconazole	0,5 (R)	0,0 c	^__ - (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para crescimento da bactéria (aumento de UFC) e negativos para morte da bactéria (diminuição das UFC) em relação ao inóculo inicial. ³ 3 Cálculo não realizado por não haver formação de UFC.	^__ - (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para crescimento da bactéria (aumento de UFC) e negativos para morte da bactéria (diminuição das UFC) em relação ao inóculo inicial.
Epoxiconazole	0,25 (½ R)	0,0 c	^__ - (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para crescimento da bactéria (aumento de UFC) e negativos para morte da bactéria (diminuição das UFC) em relação ao inóculo inicial.	^__ - (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para crescimento da bactéria (aumento de UFC) e negativos para morte da bactéria (diminuição das UFC) em relação ao inóculo inicial.
Tebuconazole	0,5 (R)	0,0 c	^__ - (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para crescimento da bactéria (aumento de UFC) e negativos para morte da bactéria (diminuição das UFC) em relação ao inóculo inicial.	^__ - (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para crescimento da bactéria (aumento de UFC) e negativos para morte da bactéria (diminuição das UFC) em relação ao inóculo inicial.
Tebuconazole	0,25 (½ R)	0,0 c	^__ - (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para crescimento da bactéria (aumento de UFC) e negativos para morte da bactéria (diminuição das UFC) em relação ao inóculo inicial.	^__ - (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para crescimento da bactéria (aumento de UFC) e negativos para morte da bactéria (diminuição das UFC) em relação ao inóculo inicial.
Azoxystrobin	0,4 (R)	0,0 c	^__ - (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para crescimento da bactéria (aumento de UFC) e negativos para morte da bactéria (diminuição das UFC) em relação ao inóculo inicial.	^__ - (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para crescimento da bactéria (aumento de UFC) e negativos para morte da bactéria (diminuição das UFC) em relação ao inóculo inicial.
Azoxystrobin	0,2 (½ R)	0,0 c	^__ - (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para crescimento da bactéria (aumento de UFC) e negativos para morte da bactéria (diminuição das UFC) em relação ao inóculo inicial.	^__ - (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para crescimento da bactéria (aumento de UFC) e negativos para morte da bactéria (diminuição das UFC) em relação ao inóculo inicial.
Fentin Hidróxido	0,5 (R)	0,0 c	^__ - (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para crescimento da bactéria (aumento de UFC) e negativos para morte da bactéria (diminuição das UFC) em relação ao inóculo inicial.	^__ - (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para crescimento da bactéria (aumento de UFC) e negativos para morte da bactéria (diminuição das UFC) em relação ao inóculo inicial.
Fentin Hidróxido	0,25 (½ R)	0,0 c	^__ - (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para crescimento da bactéria (aumento de UFC) e negativos para morte da bactéria (diminuição das UFC) em relação ao inóculo inicial.	^__ - (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para crescimento da bactéria (aumento de UFC) e negativos para morte da bactéria (diminuição das UFC) em relação ao inóculo inicial.

Tratamentos	Conc. L/ha¹ 1 Concentração utilizada dos produtos: R= recomendada, ½ R= metade da recomendada.	Média UFC/mL	% Relação à	Dif. Inóc. Inic.⁴ 4 Diferença do inóculo inicial = [(Média de UFC/mL do patógeno inoculada antes da incubação nos frascos Erlenmeyer)
		(×10⁵)	Testemunha² 2 Fórmula: [(Média de UFC/mL do tratamento/ Média de UFC/mL da testemunha × 100) – 100], sendo os valores positivos para aumento de UFC e negativos para a redução em relação à testemunha.	(×10⁵) UFC/ mL
CV (%)		9,49
Epoxiconazole	0,25 (½ R)	1180 ± 2,32 a	+333,8	+ 1178
Azoxystrobin	0,2 (½ R)	662 ± 1,39 b	+143,4	+ 660
Epoxiconazole	0,5 (R)	564 ± 2,24 b	+107,3	+ 562
Testemunha	^— – (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para aumento de UFC e negativos para redução com relação ao inóculo inicial.	272 ± 1,25 c	^— – (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para aumento de UFC e negativos para redução com relação ao inóculo inicial.	+ 270
Carbendazin	0,25 (½ R)	123 ± 0,59 d	- 54,8	+ 121
Carbendazin	0,5 (R)	63 ± 0,34 e	- 76,9	+ 61
Azoxystrobin	0,4 (R)	34 ± 0,18 e	- 87,5	+ 32
Tebuconazole	0,5 (R)	0,0 f	^— – (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para aumento de UFC e negativos para redução com relação ao inóculo inicial.	^— – (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para aumento de UFC e negativos para redução com relação ao inóculo inicial.
Tebuconazole	0,25 (½ R)	0,0 f	^— – (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para aumento de UFC e negativos para redução com relação ao inóculo inicial.	^— – (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para aumento de UFC e negativos para redução com relação ao inóculo inicial.
Fentin Hidróxido	0,5 (R)	0,0 f	^— – (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para aumento de UFC e negativos para redução com relação ao inóculo inicial.	^— – (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para aumento de UFC e negativos para redução com relação ao inóculo inicial.
Fentin Hidróxido	0,25 (½ R)	0,0 f	^— – (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para aumento de UFC e negativos para redução com relação ao inóculo inicial.	^— – (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para aumento de UFC e negativos para redução com relação ao inóculo inicial.

Tratamento	Conc. L/ha¹ 1 Concentração dos produtos: R = recomendada, ½ R = metade da recomendada.	Média UFC/mL	% Rel.	Dif. Inóc. Inic.³ 3 Diferença do inóculo inicial = [(Média de UFC/mL do patógeno inoculada antes da incubação nos frascos Erlenmeyer)	pH
		(×10⁴ – (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para aumento de UFC e negativos para redução com relação ao inóculo inicial. )	Test.² 2 Relação a testemunha, fórmula: [(Média de UFC/mL do tratamento/ Média de UFC/mL da testemunha × 100) – 100], sendo os valores positivos para aumento de UFC e negativos para a redução em relação à testemunha.	(×10⁴ – (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para aumento de UFC e negativos para redução com relação ao inóculo inicial. ) UFC/ mL	0 h	24 h
CV (%)		49,32
Testemunha	^— – (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para aumento de UFC e negativos para redução com relação ao inóculo inicial.	34 ± 0,56 abc	^— – (Média de UFC/mL do patógeno obtida após 24h de incubação)], sendo os valores positivos para aumento de UFC e negativos para redução com relação ao inóculo inicial.	+ 20	6,65	7,50
Epoxiconazole	0,5 (R)	68 ± 0,37 a	+ 100	+ 54	6,80	7,65
Azoxystrobin	0,2 (½ R)	52 ± 0,52 ab	+ 53	+ 38	6,67	7,63
Carbendazin	0,25 (½ R)	50 ± 0,75 abc	+ 47	+ 36	6,75	7,66
Epoxiconazole	0,25 (½ R)	46 ± 0,58 abc	+ 35	+ 32	6,70	7,68
Carbendazin	0,5 (R)	34 ± 0,30 abc	0	+20	6,85	7,70
Azoxystrobin	0,4 (R)	32 ± 0,30 abc	- 6	+ 18	6,85	7,68
Fentin Hidróxido	0,5 (R)	22± 0,23 bc	- 35	+ 8	7,36	7,75
Fentin Hidróxido	0,25 (½ R)	18 ± 0,38 bc	- 47	+ 4	7,03	7,75
Tebuconazole	0,5 (R)	16 ± 0,25 bc	- 53	+ 2	6,15	7,28
Tebuconazole	0,25 (½ R)	12 ± 0,22 c	- 65	- 2	6,40	7,28

Tratamento	Conc. L/ha¹ 1 Concentração utilizada dos produtos: R = recomendada, ½ R = metade da recomendada.	Germinação (1h)		Germinação (2h)
		UFC/mL (x10⁵)	% Rel. Test.² 2 Relação a testemunha, fórmula = [(Média de UFC/mL do tratamento/ Média de UFC/mL da testemunha × 100) – 100], sendo os valores positivos para aumento de UFC e negativos para a redução em relação a testemunha.	UFC/mL (x10⁵)	% Rel. Test.² 2 Relação a testemunha, fórmula = [(Média de UFC/mL do tratamento/ Média de UFC/mL da testemunha × 100) – 100], sendo os valores positivos para aumento de UFC e negativos para a redução em relação a testemunha.
CV (%)		6,03		5,18
Testemunha		618 ± 0,51 Aab	—	676 ± 1,06 Ab	—
Tebuconazole	0,5 (R)	738 ± 1,08 Ba	+19,40	792 ± 1,95 Aa	+17,16
Epoxiconazole	0,25 (½ R)	664 ± 0,68 Aab	+ 7,44	662 ± 1,67 Ab	- 2,07
Carbendazin	0,5 (R)	650 ± 1,39 Aab	+ 5,18	646 ± 0,42 Ab	- 4,44
Tebuconazole	0,25 (½ R)	650 ± 1,39 Aab	+ 5,18	622 ± 1,14 Ab	- 7,99
Carbendazin	0,25 (½ R)	646 ± 0,80 Aab	+ 4,53	526 ± 0,86 Bb	- 22,19
Azoxystrobin	0,4 (R)	638 ± 0,71 Aab	+ 3,24	642 ± 1,98 Ab	- 5,03
Epoxiconazole	0,5 (R)	636 ± 0,79 Aab	+ 2,91	632 ± 0,48 Ab	- 6,51
Azoxystrobin	0,2 (½ R)	608 ± 0,78 Bb	- 1,62	646 ± 1,39 Ab	- 4,44
Fentin Hidróxido	0,25 (½ R)	20 ± 0,42 Ac	- 96,80	14 ± 0,28 Ac	- 97,93
Fentin Hidróxido	0,5 (R)	18 ± 0,20 Ac	- 97,10	6 ± 0,18 Bc	- 99,11

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