DETECÇÃO DOS GENES DAS TOXINAS ALFA (α), BETA (β) E ÉPSILON (ε) EM AMOSTRAS DE CLOSTRIDIUM PERFRINGENS ISOLADAS DE BOVINOS PELA REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE (PCR)

DETECTION OF ALFA, BETA AND EPSILON TOXINS GENES IN CLOSTRIDIUM PERFRINGENS STRAINS ISOLATED FROM BOVINES BY THE POLIMERASE CHAIN REACTION

RESUMO

O Clostridium perfringens, microrganismo anaeróbio, está presente no solo e no trato intestinal dos mamíferos. Provoca gangrena gasosa e intoxicação alimentar nos seres humanos e doenças enterotoxêmicas nos animais domésticos. O C. perfringens é classificado em 5 tipos (A, B, C, D e E) mediante a produção de quatro toxinas principais (alfa-α, beta-β, gama-γ, delta-δ e épsilon-ε). A identificação destas toxinas é realizada através da reação de soroneutralização em animais utilizando anti-soros específicos, os quais, além do alto custo, são de difícil obtenção em laboratórios de referência internacionais. Visando contribuir para a tipificação de amostras de C. perfringens, em nosso meio, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a reação em cadeia da polimerase (PCR) na detecção dos genes que codificam as toxinas alfa (cpa), beta (cpb) e épsilon (etx) em isolamentos provenientes de bovinos. A sensibilidade analítica da técnica de PCR padronizada a partir do DNA total bacteriano foi de 2,27 ng/?L para o gene cpa e 227 pg/?L para os genes cpb e etx. Das 35 amostras de C. perfringens isoladas e tipificadas por PCR, 16 (45,7%) foram do tipo A, 18 (51,4%) foram do tipo C e 1 (2,9%) foi do tipo B.

PALAVRAS-CHAVE
Clostridium perfringens ; tipificação; bovinos; PCR