Composição Química do Soro de Pintos de Corte Alimentados com Dietas Purificadas

Blood Chemical Composition of Broiler Chicks Fed with Purified Diets

Composição Química do Soro de Pintos de Corte Alimentados com Dietas Purificadas¹

Fernanda Alvares da Silva², George Henrique Kling de Moraes², Ana Cláudia Peres Rodrigues³, Cláudio César Fonseca⁴, Maria Goreti de Almeida Oliveira², Luiz Fernando Teixeira Albino⁵, Horacio Santiago Rostagno⁵, Heloísa Torres de Freitas⁵

RESUMO - Um experimento foi conduzido com o objetivo de estudar os efeitos de níveis de ácido L-glutâmico (L-Glu) e vitamina D₃ (VD) no soro de pintos de corte de um dia, machos, Hubbard, criados em baterias aquecidas, recebendo dieta básica purificada, suplementada com 5, 10 e 15% de L-Glu combinados com 0, 5.000, 10.000 e 15.000 UI de vitamina D₃/kg. Os animais foram distribuídos em esquema fatorial em um delineamento inteiramente casualizado, com 12 tratamentos, quatro repetições e sete aves por repetição. As concentrações máximas de cálcio no soro (9,61 mg/dL) foram obtidas com 15% de L-Glu e 14.181UI de VD; 7,33 mg/dL de cálcio iônico com 15% de L-Glu e 15.664UI de VD; 7,20 mg/dL de fósforo com 10% de L-Glu e 10.863UI de VD. Os maiores valores de atividade de fosfatase alcalina no soro foram obtidos com 10% de L-Glu e na deficiência de VD. Em geral, as aves alimentadas com 10% de L-Glu e 15.000UI de VD apresentaram melhor desempenho, melhor perfil sangüíneo e menor incidência de problemas de pernas.

Palavras-chave: ácido L-glutâmico, composição química, pintos de corte, problemas de pernas, soro, vitamina D₃

Blood Chemical Composition of Broiler Chicks Fed with Purified Diets

ABSTRACT - An experiment was conducted with day-old male Hubbard, broiler chicks, reared in electrically heated batteries, and raised in wire mesh floors and fed purified amino acid diets and water ad libitum for a 14 days period. The purified diets containing all essential amino acids, vitamins and minerals at adequate levels and was supplemented with 5, 10 and 15% of L-Glu and with 0, 5,000, 10,000 and 15,000 IU of vitamin D₃. The experimental design was a factorial 3 x 4 with four replicates with seven chicks each. The blood calcium increased up (9.61mg/dL) to an estimated level of 15% of L-Glu and 14,181IU of VD, 7.33 mg/dL of ionized calcium was obtained with 15% of L-Glu and 15.664 of VD. The highest blood phosphorus (7.20 mg/dL) was obtained at an estimated level of 10% of L-Glu and 10,863IU of VD. The highest blood alkaline phosphatase was obtained at level of 10% of L-Glu and vitamin D deficiency. Birds fed 10% L-Glu and 15,000IU VD had better performance, good development of bones, and a lower incidence of leg problems.

Key Words: blood, broiler chicks, chemical composition, L-glutamic acid, leg problems, vitamin D₃

Introdução

A rápida taxa de crescimento das aves vem sendo acompanhada por inúmeros problemas, como aumento da deposição de gordura corporal e alta incidência de doenças do sistema esquelético (Sullivan, 1994).

O tecido ósseo é formado por uma estrutura orgânica composta de fibrilas, principalmente colágeno e proteínas não-colagenosas, na qual se deposita a fase mineral, composta principalmente de hidroxiapatita.

Sabe-se que a presença de quantidades adequadas de vitamina D é requerida para o crescimento normal, a maturação e mineralização do osso e para a manutenção do tecido ósseo maduro (Norman & Hurwitz, 1993; Anderson & Toverud, 1994).

Rodrigues et al. (1996) observaram que pintos alimentados com 12,5% de L-Glu apresentaram melhor crescimento ósseo em comparação aos que receberam 5%, confirmando que o nível de nitrogênio não-específico de dietas purificadas é fundamental para o desenvolvimento de pintos, conforme observações feitas por Featherston (1976), Maruyama et al. (1976) e Moraes et al. (1987).

Raquitismo experimental em aves é caracterizado pelo retardo no crescimento corporal, hipocalcemia, hipofosfatemia, atividade elevada de fosfatase alcalina no soro, hiperplasia da paratireóide e severa distorção óssea (Hedstrom et al., 1986).

Os objetivos deste estudo foram avaliar os efeitos do ácido L-glutâmico (L-Glu) e de vitamina D₃ na composição química do soro e nos problemas de pernas de pintos de corte de 1 a 14 dias de idade.

Material e Métodos

O experimento foi realizado utilizando-se um delineamento inteiramente casualizado, com esquema fatorial 3 x 4 (três níveis de ácido glutâmico x quatro níveis de vitamina D₃), totalizando 12 tratamentos, no Setor de Avicultura do Departamento de Zootecnia da UFV.

Foram utilizados 336 pintos de corte, machos, Hubbard, com 1 dia de idade com peso médio de 40 gramas, distribuídos aleatoriamente nos tratamentos. Os tratamentos consistiram de dieta básica purificada (Guimarães, 1988) (Tabela 1) contendo todos os aminoácidos essenciais, vitaminas (exceto vitamina D₃), minerais e suplementada com três níveis de ácido L-glutâmico (5, 10 e 15%) combinados com quatro níveis de vitamina D3 (0, 5.000, 10.000, 15.000 UI/kg). Cada tratamento foi aplicado a quatro repetições de sete aves cada. As aves foram alojadas em baterias aquecidas com pisos de tela elevados e receberam água e dieta ad libitum durante todo o período experimental de 14 dias.

Ao término do período experimental, seis aves de cada tratamento foram selecionadas ao acaso. A coleta de sangue foi feita por punção cardíaca, e o soro obtido, utilizado para as determinações dos teores de cálcio total, cálcio iônico, fósforo e fosfatase alcalina, no Laboratório de Bioquímica Animal do Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular da UFV.

Os soros foram diluídos com água deionizada para a determinação das concentrações de cálcio total, cálcio iônico, fosfato inorgânico e atividade de fosfatase alcalina, por intermédio de procedimentos colorimétricos (espectrofotométricos) usando kits "In Vitro Diagnostica".

As concentrações de cálcio foram determinadas pelo método O-cresolftaleína-complexona (CFC). Em pH alcalino o cálcio reage com CFC formando um complexo molecular de cor púrpura, cuja intensidade de cor é proporcional à concentração do cálcio presente na amostra e possui absorção máxima em 570 nm.

O cálcio iônico foi quantificado a partir das determinações das concentrações de cálcio total (mg/dL), proteína total (g/dL) e albumina (g/dL) no soro sangüíneo, utilizando kits "In vitro Diagnóstica".

Utilizando o método do Molibdato de Amônio, as concentrações de fósforo foram determinadas. O fósforo inorgânico reage como o molibdato de amônio, formando fosfomolibdato de amônio, que é reduzido a azul de molibdênio, cuja intensidade da cor é proporcional à concentração de íons de fósforo presentes na amostra.

A determinação da atividade de fosfatase alcalina no soro foi feita a partir do método de Roy modificado. A timolftaleína é hidrolisada pela fosfatase alcalina do soro, com liberação de timolftaleína, que em meio alcalino apresenta cor azul, cuja intensidade é diretamente proporcional á atividade enzimática.

A análise estatística dos dados obtidos foi feita por regressão. A escolha do melhor modelo baseou-se no coeficiente de determinação (R²) e na significância dos coeficientes de regressão pelo teste t de Student.

Resultados e Discussão

As concentrações médias de cálcio total, cálcio iônico, fósforo e fosfatase alcalina no soro sangüíneo encontram-se na Tabela 2. O resumo da análise de variância para as concentrações de cálcio total, cálcio iônico fósforo e fosfatase alcalina no soro sangüíneo encontra-se na Tabela 3, na qual podem ser observados efeitos significativos dos tratamentos para as variáveis analisadas.

Em geral, observou-se aumento nas concentrações de cálcio total, cálcio iônico e fósforo no soro sangüíneo com a suplementação de níveis de L-Glu e vitamina D₃.

Na Figura 1 observam-se aumentos lineares nas concentrações de cálcio até o valor máximo estimado de 9,61 mg/dL , obtido com 15% de L-Glu e 14.181UI de VD.

Na deficiência de VD, observou-se decréscimo nas concentrações de cálcio sangüíneo total, o que leva a concluir o postulado por Hurwitz (1989), que os sistemas de controle das aves são incapazes de manter a concentração normal de cálcio plasmático na ausência de VD, que resulta no declínio do cálcio plasmático de 10 mg/100 mL para aproximadamente 5 mg/100 mL.

Foi necessário um mínimo de 5.000UI de vitamina D para restabelecer as concentrações normais de cálcio no soro, reduzido em função da deficiência de VD.

Foram necessários altos níveis de VD para manter as concentrações de cálcio total no soro no limite fisiológico normal, por meio da intensificação da eficiência de absorção intestinal de cálcio, para manter as funções celulares essenciais e promover a mineralização do esqueleto, e da mobilização dos estoques de cálcio no osso.

A concentração máxima de fósforo no soro (7,20 mg/dL) foi obtida com 10% de L-Glu e 10.863UI de VD. O fósforo é um íon abundante em todos os sistemas biológicos, cuja concentração plasmática está mais sujeita a flutuações que o cálcio. Geralmente, a concentração de fósforo é metade do teor de cálcio, aproximadamente 5 mg/dL. As mais baixas concentrações de fósforo no soro foram obtidas com 5% (3,12mg/dL) e 15% (4,07mg/dL) e na deficiência de VD.

Corroborando com os resultados encontrados, Perry et al. (1991), Singh & Grewal (1994) e Goff & Horst (1995) verificaram decréscimo no cálcio, fósforo plasmático e aumento na atividade de fosfatase alcalina, quando as aves foram alimentadas com uma dieta deficiente em vitamina D por 14 dias de idade.

Os resultados sugerem que, aumentando o nível de vitamina D até uma taxa limite suportável pelo rim para transformá-la em metabólito ativo, aumenta-se a absorção intestinal de cálcio e fósforo, com conseqüente aumento no soro sangüíneo.

Ao contrário do encontrado, Zhouwen & Tat (1993) não observaram diferença significativa nas concentrações de cálcio, fósforo e fosfatase alcalina no soro sangüíneo das aves que apresentaram problemas de pernas.

Com 5% de L-Glu as aves apresentaram maior incidência de problemas de pernas (Silva et al., 2001a) e as menores concentrações de cálcio total, cálcio iônico, fósforo e fosfatase alcalina no soro sangüíneo. O mesmo comportamento foi observado por Xu & Soares Jr. (1998), que observaram pior desempenho das aves, hipocalcemia e raquitismo.

A concentração máxima estimada de cálcio iônico no soro (7,33 mg/dL) foi obtida com 15% de L-Glu e 15.664 UI de VD (Figura 2), o que corrobora o obtido por Watkins & Southern (1991) e Roberson & Edwards Jr. (1993), os quais observaram aumento significativo no cálcio iônico no soro das aves que receberam maior suplementação de vitamina D₃.

Foram observados efeitos significativos dos tratamentos nas atividades de fosfatase alcalina no soro de pintos de corte aos 14 dias de idade (Tabela 3).

Os maiores valores de atividade enzimática de fosfatase alcalina foram observados com o nível ótimo de nitrogênio não-específico (10% de L-Glu), coincidentes com as aves que apresentaram melhor desempenho e menor incidência de problemas de pernas (Silva et al., 2001a) e menores concentrações de proteínas não-colagenosas ósseas (Silva et al., 2001b).

Na deficiência de vitamina D, houve aumento na atividade de fosfatase alcalina, atribuída ao aumento na atividade dos osteoblastos. Os osteoblastos secretam grande quantidade de fosfatase alcalina, quando estão depositando ativamente a matriz óssea. Acredita-se que essa enzima aumenta a concentração local de fosfato inorgânico ou ative as fibras de colágeno, de modo a causar a deposição de sais de cálcio. Devido à difusão de certa quantidade de fosfatase alcalina no sangue, o nível dessa enzima constitui, em geral, um bom indicador da velocidade de formação óssea (Parthemore et al., 1993; Christenson, 1997).

Conclusões

As aves que apresentaram maior incidência de problemas de pernas mostraram as mais baixas concentrações de cálcio total, cálcio iônico e fósforo no soro sangüíneo e os maiores valores de atividade enzimática de fosfatase alcalina.

Foi necessário um mínimo de 5.000UI de vitamina D₃ para restabelecer as concentrações normais de cálcio no soro, reduzido em função da deficiência de vitamina D₃.

Literatura Citada

Recebido em: 14/08/01

Aceito em: 07/05/02

² Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular da UFV, Viçosa, MG. CEP: 36571-000. E.mail: [e-mail]; [e-mail]

³ Departamento de Bioquímica da UFJF, Juiz de Fora, MG.

⁴ Departamento de Veterinária da UFV, Viçosa, MG. CEP: 36571-000.

⁵ Departamento de Zootecnia da UFV, Viçosa, MG. CEP: 36571-000.

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¹

Parte da tese do primeiro autor, apresentada à Universidade Federal para obtenção do grau de "Doctor Scientiae" em Zootecnia. Projeto financiado pela Fapemig.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  09 Set 2005
• Data do Fascículo
  Jul 2002

Histórico

• Aceito
  07 Maio 2002
• Recebido
  14 Ago 2001