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Algumas exigências metabólicas de Pseudomonas denitrificans

Resumos

Para estudos da bioquímica da desnitrificação os desnitrificadores são cultivados em meio parcialmente sintético, com extrato de levedura ou de carne ou ainda peptona. Procurou-se então um meio de cultura completamente sintético no qual P. denitrificans pudesse desenvolver-se e fazer desnitrificação. Para tanto, células de um "strain" dessa bactéria foram crescidas durantes, 24 e 48 horas em tubos de ensaio contendo 10 ml de meio de cultura consistindo de succinato de sódio, nitrato de potássio, extrato de levedura o tampão de fosfato 1M, valôr pH 6,8. Dêsse meio (controle) 0,1 ml foi inoculado em 10 ml do meio de cultura em estudo, mantido então em condições parcialmente anaeróbicas. Após 24 horas uma alíquota foi retirada e suspensa em água destilada e a turbidês lida em espectrofotômetro Beckman, a 420 my. Os dados obtidos após longa série de ensaios permitiram concluir que a fim de se obter em 48 horas um crescimento da mesma ordem que o obtido com o meio controle, o meio de cultura sintético deve conter micronutrientes (Zn, Fe, Mn, Cu, Co, B e Mo, em EDTA), sulfato de sódio, sulfato de magnésio e ácido glutâmico, além de KNO3, succinato e tampão de fosfato.


The experiment described herein was performed in order to establish a completely synthetic medium for growing P. denitrificans cells. In order to obtain in 48 hr. a growth as good as that obtained with the control cultures (with yeast extract), the medium must be formed by micronutrients, the inorganic salts No2SO4, MgSO4 and (NH4)2SO4,and by an amino acid such as sodium glutamate. The KNO3 is for course needed in order to proporcionate the nitrate, and the medium must be buffered with 1M potassium phosphate buffer, pH 6.8. Succinate serves as a substrate. The role of glutamate is under investigation.


Algumas exigências metabólicas de Pseudomonas denitrificans* * Realizado com auxílio da Fundação Rockefeller.

O. J. CrocomoI; C. C. DelwicheII

ICadeira de Química Biológica, E.S.A.L.Q

IIDepartment of Soil and Plant Nutrition, Univ. of California, Davis, U.S.A

RESUMO

Para estudos da bioquímica da desnitrificação os desnitrificadores são cultivados em meio parcialmente sintético, com extrato de levedura ou de carne ou ainda peptona. Procurou-se então um meio de cultura completamente sintético no qual P. denitrificans pudesse desenvolver-se e fazer desnitrificação. Para tanto, células de um "strain" dessa bactéria foram crescidas durantes, 24 e 48 horas em tubos de ensaio contendo 10 ml de meio de cultura consistindo de succinato de sódio, nitrato de potássio, extrato de levedura o tampão de fosfato 1M, valôr pH 6,8. Dêsse meio (controle) 0,1 ml foi inoculado em 10 ml do meio de cultura em estudo, mantido então em condições parcialmente anaeróbicas. Após 24 horas uma alíquota foi retirada e suspensa em água destilada e a turbidês lida em espectrofotômetro Beckman, a 420 my.

Os dados obtidos após longa série de ensaios permitiram concluir que a fim de se obter em 48 horas um crescimento da mesma ordem que o obtido com o meio controle, o meio de cultura sintético deve conter micronutrientes (Zn, Fe, Mn, Cu, Co, B e Mo, em EDTA), sulfato de sódio, sulfato de magnésio e ácido glutâmico, além de KNO3, succinato e tampão de fosfato.

SUMMARY

The experiment described herein was performed in order to establish a completely synthetic medium for growing P. denitrificans cells.

In order to obtain in 48 hr. a growth as good as that obtained with the control cultures (with yeast extract), the medium must be formed by micronutrients, the inorganic salts No2SO4, MgSO4 and (NH4)2SO4,and by an amino acid such as sodium glutamate. The KNO3 is for course needed in order to proporcionate the nitrate, and the medium must be buffered with 1M potassium phosphate buffer, pH 6.8. Succinate serves as a substrate. The role of glutamate is under investigation.

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LITERATURA CITADA

Entregue para publicação em 20-10-66.

  • SACKS, L. E. & H. A. BARKER, 1952 - Substrate oxidation and nitrous oxide utilization in denitrification. J. Bact. 64:247-252.
  • *
    Realizado com auxílio da Fundação Rockefeller.
  • Datas de Publicação

    • Publicação nesta coleção
      19 Jun 2012
    • Data do Fascículo
      1966
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