Alkaline soluble Trypanosoma cruzi epimastigote antigen (ASEA) applied to dot-ELISA

Lissaldo, Ana Maria; Hoshino-Shimizu, Sumie; Umezawa, Eufrosina Setsu; Stolf, Anna Maria Simonsen

doi:10.1590/S0036-46651994000200012

Abstracts

The alkaline soluble Trypanosoma cruzi epimastigote antigen (ASEA) was assessed in dot-ELISA for the diagnosis of Chagas' disease. Serum samples (355) from chagasic and non-chagasic patients were studied, and IgG antibodies to ASEA were found in all patients with chronic Chagas' disease. In non-chagasic patients 95.6% were negative, except for those with leishmaniasis (visceral and mucocutaneous), and some patients from control group reacted in low titers. The data indicate that dot-ELISA using ASEA is suitable for seroepidemiologic surveys to be employed in endemic areas for Chagas' disease.

Chagas' disease; Epimastigote; Dot-ELISA; Serodiagnosis

O antígeno de epimastigota do T. cruzi solubilizado em meio alcalino (ASEA) foi avaliado em dot-ELISA para o diagnóstico da doença de Chagas. Amostras de soros (355) de chagásicos e não chagásicos foram estudadas e anticorpos IgG contra ASEA foram encontrados em todos os pacientes com a doença de Chagas crônica. Em pacientes não chagásicos, os resultados foram negativos (95,6%), exceto para aqueles com leishmaniose visceral e mucocutânea, e para alguns do grupo controle que reagiram em títulos baixos. Os dados indicam que o ensaio de dot-ELISA, utilizando o ASEA é apropriado para estudos soroepidemiológicos a serem conduzidos em áreas endêmicas da doença de Chagas, tendo em mente a limitação do teste em áreas onde Doença de Chagas e leishmaniose estão presentes.

SHORT COMMUNICATION

Alkaline soluble Trypanosoma cruzi epimastigote antigen (ASEA) applied to dot-ELISA

Antígeno de Epimastigota de Trypanosoma cruzi, solubilizado em meio alcalino (ASEA) aplicado em dot-ELISA

Ana Maria Lissaldo^I; Sumie Hoshino-Shimizu^III; Eufrosina Setsu Umezawa^II; Anna Maria Simonsen Stolf^I

^IInstituto de Ciências Biomédicas, USP, São Paulo, Brasil

^IIInstituto de Medicina Tropical de São Paulo, São Paulo, Brasil

^IIIInstituto Adolfo Lutz, São Paulo, Brasil

^{Correspondence to} Correspondence to: Dr. Eufrosina Setsu Umezawa Laboratório de Protozoologia - IMT Av. Dr. Enéas de Carvalho Aguiar, 470 05403-000 - São Paulo, SP, Brazil

SUMMARY

The alkaline soluble Trypanosoma cruzi epimastigote antigen (ASEA) was assessed in dot-ELISA for the diagnosis of Chagas' disease. Serum samples (355) from chagasic and non-chagasic patients were studied, and IgG antibodies to ASEA were found in all patients with chronic Chagas' disease. In non-chagasic patients 95.6% were negative, except for those with leishmaniasis (visceral and mucocutaneous), and some patients from control group reacted in low titers. The data indicate that dot-ELISA using ASEA is suitable for seroepidemiologic surveys to be employed in endemic areas for Chagas' disease.

Keywords: Chagas' disease; Epimastigote; Dot-ELISA; Serodiagnosis.

RESUMO

O antígeno de epimastigota do T. cruzi solubilizado em meio alcalino (ASEA) foi avaliado em dot-ELISA para o diagnóstico da doença de Chagas. Amostras de soros (355) de chagásicos e não chagásicos foram estudadas e anticorpos IgG contra ASEA foram encontrados em todos os pacientes com a doença de Chagas crônica. Em pacientes não chagásicos, os resultados foram negativos (95,6%), exceto para aqueles com leishmaniose visceral e mucocutânea, e para alguns do grupo controle que reagiram em títulos baixos. Os dados indicam que o ensaio de dot-ELISA, utilizando o ASEA é apropriado para estudos soroepidemiológicos a serem conduzidos em áreas endêmicas da doença de Chagas, tendo em mente a limitação do teste em áreas onde Doença de Chagas e leishmaniose estão presentes.

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ACKNOWLEDGEMENTS

This work was supported by: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) and Laboratórios de Investigação Médica (LIM-49).

Recebido para publicação em 03/08/1993.

Aceito para publicação em 01/02/1994.

1. ARAUJO, F.G. - A method for demonstration of antibodies to Trypanosoma cruzi by using antigen-coated nitrocellulose paper strips. Amer. J. trop. Med. Hyg., 34: 242-248, 1985.
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4. CAMARGO, M.E. - Fluorescent antibody test for the serodiagnosis of American trypanosomiasis. Technical modification employing preserved culture forms of Trypanosoma cruzi in a slide test. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 8: 227-234, 1966.
5. CAMARGO, M.E. & REBONATO, C. - Cross reactivity of immunofluorescence tests for trypanosoma and leishmania antibodies. A simple inhibition procedure to ensure specific results. Amer. J. trop. Med. Hyg., 18: 500-505, 1969.
6. CAMARGO, M.E. - Serological diagnosis: an appraisal of Chagas' disease serodiagnosis. In: WENDEL, S.; BRENER, Z.; CAMARGO, M.E. & RASSI, A. Chagas' disease (American trypanosomiasis): its impact on transfusion and clinical medicine. Săo Paulo, ISBT, 1992. p. 165-178.
7. FERREIRA, A.W.; BELEM, Z.R.; MOURA, M.E. & CAMARGO, M.E. - Aspectos da padronizaçăo do teste sorológico para a doença de Chagas: um teste imunoenzimático para triagem de doadores de sangue. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 33: 123-128, 1991.
8. HOSHINO-SHIMIZU, S.; CAMARGO, M.E. & NAGASSE, T.K. - A stable polysaccharide hemagglutination reagent for the diagnosis of acute or recent Trypanosoma cruzi infections. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 20: 208-212, 1978.
9. HOSHINO-SHIMIZU, S.; NAGASSE-SUGAHARA, T.K.; CASTILHO, E.A.; CAMARGO, M.E. & SHIMIZU, T.A. - Control chart method for evaluating hemmaglutination reagent used in Chagas' disease diagnosis. Bull. Pan Amer. Hlth. Org., 20: 170-178, 1986.
10. HUBSCH, R.M.; CHIECHIE, N.; COMACH, G.; ALDAO, R.R. & GUSMĂO, R.A. - El ensayo inmunoenzimatico en microgotas sobre nitrocellulosa (dot-ELISA) en el diagnostico de la enfermedad de Chagas. I - Estudio comparativo de dos preparaciones antigenicas de Trypanosoma cruzi. Mem. Inst. Oswaldo Cruz, 83: 277-285, 1988.
11. LOWRY, O.H.; ROSEBROUGH, N.J.; FARR, L. & RANDALL, R.J. - Protein measurement with the Folin phenol reagent. J. biol. Chem., 193: 265-275, 1951.
12. LUTZ, W. - Statistical methods as applied to immunological data. In: WEIR, D. M. - Handbook of experimental immunology. Oxford, Blackwell Scientific Publications, 1967. p. 1163-1202.
13. MATSUMOTO, T.K.; HOSHINO-SHIMIZU, S.; NAKAMURA, P.M.; ANDRADE Jr., H.F. & UMEZAWA, E.S. - High resolution of Trypanosoma cruzi amastigote antigen in serodiagnosis of different clinical forms of Chagas' disease. J. clin. Microbiol., 31: 1486-1492, 1993.
14. PAPPAS, M.G. - Recent applications of the dot-ELISA in immunoparasitology. J. immunol. Meth., 64: 205-214, 1983.
15. PRIMAVERA, K.; UMEZAWA, E.S.; PERES, B.A.; CAMARGO, M.E. & HOSHINO-SHIMIZU, S. - Chagas' disease: IgA, IgM and IgG antibodies to T. cruzi, amastigote, trypomastigote and epi-mastigote antigens in acute and in different chronic forms of the disease. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 32: 172-180, 1990.
16. TAKEI, K. - Estudo da eficięncia relativa dos diferentes testes sorológicos utilizados no diagnóstico da doença de Chagas. Resultados observados na análise de 10.181 soros. Săo Paulo, 1982. (Tese de Doutoramento - Instituto de Cięncias Biomédicas da Universidade de Săo Paulo).
17. VITOR, R.W.A. & CHIARI, E. - Avaliaçăo de antígenos do Trypanosoma cruzi para a reaçăo de hemaglutinaçăo indireta. I. Diferentes extratos antigęnicos. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 29: 178-182, 1987.

Correspondence to:

Dr. Eufrosina Setsu Umezawa

Laboratório de Protozoologia - IMT

Av. Dr. Enéas de Carvalho Aguiar, 470

05403-000 - São Paulo, SP, Brazil

Publication Dates

Publication in this collection
20 Sept 2006
Date of issue
Apr 1994

History

Received
03 Aug 1993
Accepted
01 Feb 1994

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[1] 1. ARAUJO, F.G. - A method for demonstration of antibodies to Trypanosoma cruzi by using antigen-coated nitrocellulose paper strips. Amer. J. trop. Med. Hyg., 34: 242-248, 1985.

[2] 2. BENNET, F.C. & YEOMAN, L.C. - An improved procedure for the dot-immunobinding analysis of hibridoma supernatants. J. immunol. Meth., 61: 201-207, 1983.

[3] 3. CAMARGO, E.P. - Growth and differentiation in Trypanosoma cruzi. I - Origin of metacyclic trypanosomes in liquid media. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 6: 93-100, 1965.

[4] 4. CAMARGO, M.E. - Fluorescent antibody test for the serodiagnosis of American trypanosomiasis. Technical modification employing preserved culture forms of Trypanosoma cruzi in a slide test. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 8: 227-234, 1966.

[5] 5. CAMARGO, M.E. & REBONATO, C. - Cross reactivity of immunofluorescence tests for trypanosoma and leishmania antibodies. A simple inhibition procedure to ensure specific results. Amer. J. trop. Med. Hyg., 18: 500-505, 1969.

[6] 6. CAMARGO, M.E. - Serological diagnosis: an appraisal of Chagas' disease serodiagnosis. In: WENDEL, S.; BRENER, Z.; CAMARGO, M.E. & RASSI, A. Chagas' disease (American trypanosomiasis): its impact on transfusion and clinical medicine. Săo Paulo, ISBT, 1992. p. 165-178.

[7] 7. FERREIRA, A.W.; BELEM, Z.R.; MOURA, M.E. & CAMARGO, M.E. - Aspectos da padronizaçăo do teste sorológico para a doença de Chagas: um teste imunoenzimático para triagem de doadores de sangue. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 33: 123-128, 1991.

[8] 8. HOSHINO-SHIMIZU, S.; CAMARGO, M.E. & NAGASSE, T.K. - A stable polysaccharide hemagglutination reagent for the diagnosis of acute or recent Trypanosoma cruzi infections. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 20: 208-212, 1978.

[9] 9. HOSHINO-SHIMIZU, S.; NAGASSE-SUGAHARA, T.K.; CASTILHO, E.A.; CAMARGO, M.E. & SHIMIZU, T.A. - Control chart method for evaluating hemmaglutination reagent used in Chagas' disease diagnosis. Bull. Pan Amer. Hlth. Org., 20: 170-178, 1986.

[10] 10. HUBSCH, R.M.; CHIECHIE, N.; COMACH, G.; ALDAO, R.R. & GUSMĂO, R.A. - El ensayo inmunoenzimatico en microgotas sobre nitrocellulosa (dot-ELISA) en el diagnostico de la enfermedad de Chagas. I - Estudio comparativo de dos preparaciones antigenicas de Trypanosoma cruzi. Mem. Inst. Oswaldo Cruz, 83: 277-285, 1988.

[11] 11. LOWRY, O.H.; ROSEBROUGH, N.J.; FARR, L. & RANDALL, R.J. - Protein measurement with the Folin phenol reagent. J. biol. Chem., 193: 265-275, 1951.

[12] 12. LUTZ, W. - Statistical methods as applied to immunological data. In: WEIR, D. M. - Handbook of experimental immunology. Oxford, Blackwell Scientific Publications, 1967. p. 1163-1202.

[13] 13. MATSUMOTO, T.K.; HOSHINO-SHIMIZU, S.; NAKAMURA, P.M.; ANDRADE Jr., H.F. & UMEZAWA, E.S. - High resolution of Trypanosoma cruzi amastigote antigen in serodiagnosis of different clinical forms of Chagas' disease. J. clin. Microbiol., 31: 1486-1492, 1993.

[14] 14. PAPPAS, M.G. - Recent applications of the dot-ELISA in immunoparasitology. J. immunol. Meth., 64: 205-214, 1983.

[15] 15. PRIMAVERA, K.; UMEZAWA, E.S.; PERES, B.A.; CAMARGO, M.E. & HOSHINO-SHIMIZU, S. - Chagas' disease: IgA, IgM and IgG antibodies to T. cruzi, amastigote, trypomastigote and epi-mastigote antigens in acute and in different chronic forms of the disease. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 32: 172-180, 1990.

[16] 16. TAKEI, K. - Estudo da eficięncia relativa dos diferentes testes sorológicos utilizados no diagnóstico da doença de Chagas. Resultados observados na análise de 10.181 soros. Săo Paulo, 1982. (Tese de Doutoramento - Instituto de Cięncias Biomédicas da Universidade de Săo Paulo).

[17] 17. VITOR, R.W.A. & CHIARI, E. - Avaliaçăo de antígenos do Trypanosoma cruzi para a reaçăo de hemaglutinaçăo indireta. I. Diferentes extratos antigęnicos. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 29: 178-182, 1987.

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