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DOT-ELISA for detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies in human cerebrospinal fluid using a new solid-phase (resin-treated polyester fabrics): preliminary report

DOT-ELISA para pesquisa de anticorpos anti-Cysticercus cellulosae em líquido cefalorraquiano empregando uma nova fase sólida (tecido de poliéster tratado com resina polimerizada): dados preliminares

Abstracts

A dot enzyme-linked immunosorbent assay (DOT-ELISA) was developed to detect specific antibodies in cerebrospinal fluid (CSF) for human neurocysticercosis immunodiagnosis, with Cysticercus cellulosae antigen dotted on a new solid-phase. This was represented by sheets of a synthetic polyester fabric impregnated with a polymerized resin (N-methylol-acrylamide). A very stable preparation was thus obtained, the antigen being covalently bound by cross-linking with free N-methylol groups on the resin. Since robust, no special care was necessary for handling the solid-phase. The test could be performed at room-temperature. From 30 CSF samples assayed, 14 were positive, from a group of 15 cases of neurocysticercosis, with titers from 1 to 128; 15 other samples, from normals or other neurological diseases, were all negative. Test characteristics seem to indicate it as adequate for epidemiological surveys. A more detailed study on sensitivity, specificity, reproducibility and the use in serum samples is being conducted.

Neurocysticercosis; DOT-ELISA; Polyester-resin; Solid-phase; Cerebrospinal fluid


Foi desenvolvido o teste DOT-ELISA em tecido de poliéster tratado com resina polimerizada (NMA) para o imunodiagnóstico da neurocisticercose (NC) humana pesquisando anticorpos específicos em líquido cefalorraquiano (LCR). O teste pode ser empregado em levantamentos epidemiológicos e em laboratórios de média e baixa complexidade, já que todas as etapas são realizadas a temperatura ambiente, o antígeno é covalentemente ligado ao suporte permitindo obter um reagente estável, e o suporte sensibilizado não requer cuidados especiais no seu manuseio. Foram ensaiadas 30 amostras de LCR; todas as 15 amostras do grupo controle foram negativas e 14 (93,3%) das 15 amostras de LCR do grupo de pacientes com NC foram positivas (títulos de 1 a 128). Os estudos de sensibilidade, especificidade, reprodutibilidade, estabilidade e padronização do uso de soro como amostra estão em andamento.


PRELIMINARY REPORT

DOT-ELISA for detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies in human cerebrospinal fluid using a new solid-phase (resin-treated polyester fabrics). Preliminary report

DOT-ELISA para pesquisa de anticorpos anti-Cysticercus cellulosae em líquido cefalorraquiano empregando uma nova fase sólida (tecido de poliéster tratado com resina polimerizada). Dados preliminares

Adelaide José VazI; Antonio Walter FerreiraII,III; Mário E. CamargoII,III; Paulo Mutuko NakamuraI; Eide Dias CamargoI

IInstituto Adolfo Lutz — Divisão de Biologia Médica, Serviço de Microbiologia e Imunologia, Laboratório de Imunodiagnóstico. São Paulo, SP, Brasil

IIInstituto de Medicina Tropical de São Paulo — Departamento de Moléstias Infecciosas e Parasitárias, Laboratório de Soroepidemiologia. São Paulo, SP, Brasil

IIIBiolab Diagnostica S.A.

Address for correspondence Address for correspondence: Dra. Adelaide José Vaz Instituto Adolfo Lutz Av. Dr. Arnaldo, 355 CEP 01246 São Paulo, SP, Brasil

SUMMARY

A dot enzyme-linked immunosorbent assay (DOT-ELISA) was developed to detect specific antibodies in cerebrospinal fluid (CSF) for human neurocysticercosis immunodiagnosis, with Cysticercus cellulosae antigen dotted on a new solid-phase. This was represented by sheets of a synthetic polyester fabric impregnated with a polymerized resin (N-methylol-acrylamide). A very stable preparation was thus obtained, the antigen being covalently bound by cross-linking with free N-methylol groups on the resin. Since robust, no special care was necessary for handling the solid-phase. The test could be performed at room-temperature.

From 30 CSF samples assayed, 14 were positive, from a group of 15 cases of neurocysticercosis, with titers from 1 to 128; 15 other samples, from normals or other neurological diseases, were all negative. Test characteristics seem to indicate it as adequate for epidemiological surveys. A more detailed study on sensitivity, specificity, reproducibility and the use in serum samples is being conducted.

Key words: Neurocysticercosis; DOT-ELISA; Polyester-resin; Solid-phase; Cerebrospinal fluid.

RESUMO

Foi desenvolvido o teste DOT-ELISA em tecido de poliéster tratado com resina polimerizada (NMA) para o imunodiagnóstico da neurocisticercose (NC) humana pesquisando anticorpos específicos em líquido cefalorraquiano (LCR). O teste pode ser empregado em levantamentos epidemiológicos e em laboratórios de média e baixa complexidade, já que todas as etapas são realizadas a temperatura ambiente, o antígeno é covalentemente ligado ao suporte permitindo obter um reagente estável, e o suporte sensibilizado não requer cuidados especiais no seu manuseio. Foram ensaiadas 30 amostras de LCR; todas as 15 amostras do grupo controle foram negativas e 14 (93,3%) das 15 amostras de LCR do grupo de pacientes com NC foram positivas (títulos de 1 a 128). Os estudos de sensibilidade, especificidade, reprodutibilidade, estabilidade e padronização do uso de soro como amostra estão em andamento.

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ACKNOWLEDGEMENTS

We wish to thank Drs. José A. Livramento and Luis R. Machado of the Neurological Investigations Center, Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo, and Dr. Marcos V. da Silva, of Emílio Ribas Hospital, for providing CSF samples. We also thank Ms. Maria Emilia G. Moura of Biolab Diagnóstica S.A. for preparing the resin-treated polyester fabrics.

Recebido para publicação em 13/11/1989.

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  • Address for correspondence:

    Dra. Adelaide José Vaz
    Instituto Adolfo Lutz
    Av. Dr. Arnaldo, 355
    CEP 01246 São Paulo, SP, Brasil
  • Publication Dates

    • Publication in this collection
      12 Sept 2006
    • Date of issue
      Oct 1990

    History

    • Received
      13 Nov 1989
    Instituto de Medicina Tropical de São Paulo Av. Dr. Enéas de Carvalho Aguiar, 470, 05403-000 - São Paulo - SP - Brazil, Tel. +55 11 3061-7005 - São Paulo - SP - Brazil
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