Acessibilidade / Reportar erro

Citoquímica de inclusões intranucleares associadas ao vírus do mosaico amarelo do salsão

Cytochemical studies of the intranuclear inclusions associated with the celery yellow mosaic virus (CYMV)

Resumos

Estudos citoquímicos, ao nível do microscópio óptico, foram efetuados para determinar a natureza química de inclusões intranucleares, de aspecto fibroso, induzidas pelo vírus do mosaico amarelo do salsão na maioria de suas hospedeiras. Os testes citoquímicos foram conduzidos em material foliar fresco ou fixado (aldeído glutárico, Carnoy 3:1 ou Bouin), tendo sido feitas as seguintes reações: hematoxilina férrica (testemunha); Sudan IV e Azul do Nilo (lipídios); iodo-iodeto (amido); Feulgen, Azur B e verde-de-metila-pironina (ácidos nucleicos); ninidrina-Schiff e "Fast Green", este último em soluções ácida e alcalina (proteínas). Os testes com verde-de-metila-pironina, Azur B e ninidrina-Schiff foram combinados com digestão enzimática pela ribonuclease ou pepsina. Os dados obtidos sugerem que, dentro da sensibilidade dos testes realizados, a inclusão contenha proteína, mas não tenha amido, lipídios ou ácidos nucleicos. Isso permite supor, portanto, que essas inclusões não sejam formadas de partículas de vírus.


Cytochemical studies at optical microscopic level were made to determine the chemical nature of intranuclear inclusions with fibrous aspect which were induced by the celery yellow mosaic virus (CYMV) in most of its hosts. The cytochemical tests were carried on fresh as well on fixed foliar material, fixation being in glutaric aldeid, Carnoy 3:1 or Bouin. The following reactions were tried: ferric haematoxylin (control); Sudan IV and Nile blue (for lipids); iodine ioduret (for starch); Feulgen, azur B and methyl green-pyronin (for nucleic acids); ninhydrin-Schiff and fast-green, the latter in acid and in alcaline solution (for protein). The tests with methyl green-pyronin, azur B and ninhydrin-Schiff were combined with enzimatic digestion with RNase or pepsin. The results suggest that, within the sensibility of the tests, the inclusion contains protein but does not contain starch, lipids or nucleic acids. This permit to suppose, therefore, such inclusions not to be formed of virus particles.


Citoquímica de inclusões intranucleares associadas ao vírus do mosaico amarelo do salsão1 1 Este trabalho recebeu auxílios financeiros do CNPq e da FAPESP. Apresentado na XX Reunião Anual da S.B.P.C, em julho de 1968, em São Paulo.

Cytochemical studies of the intranuclear inclusions associated with the celery yellow mosaic virus (CYMV)

Neusa D. da CruzI; Dixier M. MedinaII; E. W. KitajimaIII; A. S. CostaIII; Carminda C. LandinIV, 2 2 Com bolsas de suplementação do CNPq.

IBiologista

IIEngenheira-agrônoma, Seção de Citologia

IIIEngenheiros-agrônomos, Seção de Virologia Fitotécnica, Instituto Agronômico

IVLivre-docente, Cadeira de Biologia Gerai e Educacional, Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Rio Claro

SINOPSE

Estudos citoquímicos, ao nível do microscópio óptico, foram efetuados para determinar a natureza química de inclusões intranucleares, de aspecto fibroso, induzidas pelo vírus do mosaico amarelo do salsão na maioria de suas hospedeiras.

Os testes citoquímicos foram conduzidos em material foliar fresco ou fixado (aldeído glutárico, Carnoy 3:1 ou Bouin), tendo sido feitas as seguintes reações: hematoxilina férrica (testemunha); Sudan IV e Azul do Nilo (lipídios); iodo-iodeto (amido); Feulgen, Azur B e verde-de-metila-pironina (ácidos nucleicos); ninidrina-Schiff e "Fast Green", este último em soluções ácida e alcalina (proteínas). Os testes com verde-de-metila-pironina, Azur B e ninidrina-Schiff foram combinados com digestão enzimática pela ribonuclease ou pepsina.

Os dados obtidos sugerem que, dentro da sensibilidade dos testes realizados, a inclusão contenha proteína, mas não tenha amido, lipídios ou ácidos nucleicos. Isso permite supor, portanto, que essas inclusões não sejam formadas de partículas de vírus.

SUMMARY

Cytochemical studies at optical microscopic level were made to determine the chemical nature of intranuclear inclusions with fibrous aspect which were induced by the celery yellow mosaic virus (CYMV) in most of its hosts.

The cytochemical tests were carried on fresh as well on fixed foliar material, fixation being in glutaric aldeid, Carnoy 3:1 or Bouin. The following reactions were tried: ferric haematoxylin (control); Sudan IV and Nile blue (for lipids); iodine ioduret (for starch); Feulgen, azur B and methyl green-pyronin (for nucleic acids); ninhydrin-Schiff and fast-green, the latter in acid and in alcaline solution (for protein). The tests with methyl green-pyronin, azur B and ninhydrin-Schiff were combined with enzimatic digestion with RNase or pepsin.

The results suggest that, within the sensibility of the tests, the inclusion contains protein but does not contain starch, lipids or nucleic acids. This permit to suppose, therefore, such inclusions not to be formed of virus particles.

Texto completo disponível apenas em PDF.

Full text available only in PDF format.

LITERATURA CITADA

Recebido para publicação em 30 de dezembro de 1971.

  • 1. ALFERT, M. & GESCHWIND, I. I. A selective staining method for the basic proteins of cell nuclei. Proc. natn. Acad. Sci. U.S.A.. 39:991-999, 1953.
  • 2. BAKER, J. R. Further remarks on histochemical recognition of lipids. Q. J. microsc. Sci. 88:463-465, 1947.
  • 3. CAIN, A. J. The use of Nile-blue in the examination of lipids. Q. J. microsc. Sci. 88:383-392, 1947.
  • 4. FLAX, M. H. & HIMES, N. H. Microspectrophotometric analysis of metachromatic staining of nucleic acids. Physiol. Zoöl. 25:297-320, 1952.
  • 5. GERSCH, I. Fixation and staining. In: BRACHET, J., ed. The cell: biochemistry, physiology, and morfology. New York, Academic Press, 1959. v. 1.
  • 6. HUMASON, L. Animal tissue techniques. San Francisco, Freeman, 1962. 468p.
  • 7. JOHANSEN, D. A. Plant microtecnique. New York, McGraw-Hill, 1940. 523p.
  • 8. KASTEN, F. H. Cytochemical studies with acridine orange and the influence of dye contaminants in the staining of nucleic acids. Int. Rev. Cytol. 21:142-197, 1967.
  • 9. KITAJIMA, E. W. & COSTA, A. S. Morfologia do virus do mosaico amarelo do salsăo. Bragantia 27:VII-VIII, 1968. Nota 3.
  • 10. _________ & _________. Inclusőes fibrosas intranucleares em plantas infetadas pelo vírus do mosaico amarelo do salsăo. Bragantia 27:IX-XI, 1968. Nota 4.
  • 11. KURNICK, N. B. Pyronin Y in the methyl-green-pyronin histological stain. Stain Technol. 30:213-230, 1955.
  • 12. LISON, L. Histochimie et cytochimie animales. Paris, Gauthier-Villars, 1953. 2v.
  • 13. LITTAU, V. C. & BLACK, L. M. Spherical inclusions in plant tissues caused by a virus. Am. J. Bot. 39:87-95, 1952.
  • 14. MCWHORTER, F. P. Plant virus inclusions. A. Rev. Phytophat. 3:287-312, 1965.
  • 15. MEDINA, D. M. & CONAGIN, C. T. T. M. Técnica citológica. Campinas, Instituto Agronômico, 1964. 107p. (Publicaçăo 2610)
  • 16. ROBB, S. M. Location, structure and cytochemical staining reactions of the inclusion bodies found in Dahlia variabilisinfected with Dahlia mosaic virus. Virology 23:141-144, 1964.
  • 17. SHIKATA, E. & MARAMOROSCH, K. Electron microscopy of wound tumor virus assembly sites in insect vectors and plants. Virology 32:367-377, 1967.
  • 18. TAFT, N. B. The problem of a standartized technique for the methil green pyronin stain. Stain Technol. 26:205-212. 1951.
  • 19. YASUMA, A. & ICHIKAWA, T. Ninhydrin-Schiff and alloxan-Schiff staining. A new histochemical staining method for proteins. J. Lab. clin. Med. 41:296-299, 1953.
  • 1
    Este trabalho recebeu auxílios financeiros do CNPq e da FAPESP. Apresentado na XX Reunião Anual da S.B.P.C, em julho de 1968, em São Paulo.
  • 2
    Com bolsas de suplementação do CNPq.
  • Datas de Publicação

    • Publicação nesta coleção
      17 Mar 2009
    • Data do Fascículo
      1972

    Histórico

    • Recebido
      30 Dez 1971
    Instituto Agronômico de Campinas Avenida Barão de Itapura, 1481, 13020-902, Tel.: +55 19 2137-0653, Fax: +55 19 2137-0666 - Campinas - SP - Brazil
    E-mail: bragantia@iac.sp.gov.br