Células dendríticas (CDs) são células apresentadoras de antígenos altamente eficientes para a imunização contra patógenos e antígenos tumorais. A obtenção de CDs maturis tem sido descrita por diferentes métodos. Portanto, a escolha do método mais apropriado para gerar CDs em cultura de sete dias é pré-requisito essencial para as estratégias imunoterápicas. Aqui relatamos um método de obtenção de uma população enriquecida em monócitos de doadores de sangue e comparamos a maturação das CDs sob o estímulo de quatro agentes. Uma população de monócitos, com pureza de 91% ± 5, foi obtida de 15 doadores. A população monocitária foi mantida em cultura por cinco dias com GM- CSF e IL - 4. No 5º dia, após diferentes condições de maturação, foram analisadas as modificações morfológicas e fenotípicas. Nossos estudos demonstram que o TNF-alfa ou o PGE1 por si só podem induzir a expressão de CD1a de 2.4 a 2.7 vezes, respectivamente, mais do que culturas de CDs com ausência dos agentes de maturação. Alternativamente, para com outras moléculas coestimuladoras ou acessórias (CD80, CD86, CD83 e CD 40) o TNF-alfa foi mais potente na expressão do que o PGE1, embora na presença de ambos o efeito seja mais pronunciado. A maturação fenotípica sob TNF-alfa + PGE1 pode ser comparável ao LPS, concluindo que o TNF-alfa + PGE1 pode ser útil para geração ex-vivo de CDs e útil para protocolos de vacinação celular. Avaliação funcional das CDs é recomendável.
Células dendríticas; monócitos; Percoll; maturação; imunoterapia
