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Análise de proteínas do Toxoplasma gondii após solubilização com Triton X-114 e cromatografia hidrofóbica

A distribuição das proteínas superficiais de Toxoplasma gondii radiodinadas, foram estudadas usando a técnica de separação de fases e a capacidade de ligação em coluna de fenil-Sepharose. Oito polipeptídeos com peso molecular entre 22 e 180.000 distribuíram-se exclusivamente na fase rica em detergente enquanto seis polipeptídeos com PM entre 15.00 e 76.000 distribuíram-se exclusivamente na fase pobre em detergente. Dois polipeptídeos com 15.00 e 70.000 distribuem-se em ambas as fases. Todos os polipeptídeos presentes na fase rica em detergente foram retidos por coluna de fenil-Sepharose e isolados em dois picos de acordo com sua hidrofobicidade relativa. Dois polipeptídeos hidrofóbicos com PM 60.000 e 66.000 reconhecidos por soro humano, foram isolados pela associação das duas técnicas. Os nossos resultados mostram que as proteínas de superfície do T. gondii possuem diferentes graus de hidrofobicidade e que o emprego da cromatografia de interação hidrofóbica após extração com Triton X-114, pode ser um importante método de isolamento de proteínas de membrana.

Toxoplasma gondii; Triton X-114; hidrofobicidade; proteínas de membrana; cromatografia hidrofóbica


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