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Colorimetric determination of alpha and beta-cyclodextrins and studies on optimization of CGTase production from B. firmus using factorial designs

A produção de ciclodextrina glicosiltransferase (EC2.4.1.19, CGTase) de B. firmus isolada de solo de Curitiba, PR, foi otimizada com o uso de modelo estatístico fatorial. Foi estudado o efeito de componentes no meio básico bem como pH inicial e temperatura na produção da enzima. O modelo de fatorial 2k-1 foi usado. A atividade da CGTase foi monitorada pelo método colorimétrico com alaranjado de metila. Houve produção da CGTase quando a fonte de carbono era amido e beta-CD, mas quando galactose, lactose, sacarose e maltose foram usadas, nγo houve nenhuma produηγo de enzima. A produηão de CGTase foi a mesma com a fonte de nitrogênio orgânico ou inorgânico. A atividade da CGTase diminuiu 2 vezes quando a temperatura de incubação foi aumentada de 28 a 37 ° C, e diminuiu 2,1 vezes quando o pH inicial foi abaixado de 10,3 a 7,4. As determinações colorimetricas de alfa e beta - CD foram analisadas como regressão não linear e a constante de equilíbrio para os complexos alfa -CD/alaranjado de metila e beta -CD/fenolftaleina foram 7,69 x 10³ L/mol e 2,33 x 10³L/mol, respectivamente.


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