Proteinorraquia. Estudo crítico de métodos de dosagem

Spina França Netto, A.; da Cunha Cerqueira, F. M.; Amar, Isaac

doi:10.1590/S0004-282X1955000400003

Resumos

Tendo em vista as diferenças existentes entre as taxas consideradas normais pelos diversos autores para a proteinorraquia, foi feito um estudo para verificar até que ponto tais diferenças podem ser explicadas por condições de técnica. Quatro métodos de determinação do conteúdo protêico total do liqüido cefalorraquidiano foram analisados - dois baseados em turbidimetria e dois em colorimetria - sendo utilizado o espectrofotômetro Coleman Junior, modêlo 6-A. Os métodos turbidimétricos foram os de Bossak, Rosenberg e Harris e o de Denis e Ayer e os colorimétricos de Macheboeuf e Rebeyrotte e de Dittebrandt. Para cada um foi preparada carta de calibração utilizando diluições cuidadosamente preparadas de misturas de líquores límpidos e incolores, nas quais fôra efetuada, prèviamente, a determinação do teor protêico pelo método de Kjeldahl. Determinações da taxa protêica foram feitas em certo número de amostras (entre 80 e 100) para cada método, sendo as concentrações correspondentes calculadas mediante a carta de calibração estabelecida. O conteúdo protêico de cada uma delas tinha sido avaliado de modo aproximado pelo método de Nissl. Os dados obtidos mostraram a influência do êrro instrumental efetivo em relação às taxas pequenas, particularmente nos métodos colorimétricos, a qual foi acompanhada de elevação das respectivas médias dos valores de concentração. Esta elevação foi evidenciada também em uma série de 20 líquores cujo conteúdo protêico foi determinado concomitantemente pelos quatro métodos; a freqüência de distribuição de quatro séries de amostras, em zonas de concentração, para cada um dos métodos, mostrou um número maior em zonas correspondentes a teores protêicos mais elevados para aquêles métodos sujeitos a êrro instrumental efetivo maior. Êstes dados vêm trazer um elemento para a compreensão das diferentes taxas consideradas normais na literatura, as quais variam, às vêzes, entre limites muito amplos. A determinação precisa assume grande importância quando encarada do ponto de vista clínico, principalmente quando se tem em vista o estudo dos aumentos discretos que podem ocorrer precocemente em certas afecções neurológicas, servindo de elemento de orientação diagnóstica.

On the basis of the difference among values stated as normal by different authors to protein content of cerebrospinal fluid the present study was enterprised to verify whether these differences might be introduced by technical conditions. Four methods for protein determination were studied; two based on turbidimetric reactions and two on colorimetric ones. The first two were the trichloracetic acid method of Bossak, Rosenberg and Harris and the sulphosalycilic acid method of Denis and Ayer; the colorimetric methods were those of Dittebrandt (Weichselbaum biuret reagent) and of Macheboeuf and Rebeyrotte (nitric acid reagent). The calibration was conducted in a Coleman Junior spectrophotometer model 6-A with carefully prepared dilutions of pools of cerebrospinal fluids clear and colourless whose protein content was previously determined by the Kjeldahl procedure. Determination of protein content were made in several specimens of cerebrospinal fluid by each one of the methods and concentrations calculated through the calibration curves established. The protein content of all samples was previously evaluated by the Nissl method in an approximative way. The data obtained showed an influence of the effective instrument error on the normal taxes, specially on the colorimetric methods analised. This was accompanied by a rise in the mean values for each one. The data of twenty specimens whose protein content was estimated concomitantly by the four methods bring further evidence as to agree with this. The frequency of distribution in concentration zones of four series of specimens studied by each one of the methods showed a larger distribution in regions of higher protein concentration for methods with increased influence of effective instrument error. The present data give a way to understand the different taxes supported as normal in the literature whose range is sometimes too much extent, bringing difficulty in the evaluation of slight increasings in protein content which bare importance in the early diagnosis of some neurological affections.

A. Spina França Netto^I; F. M. da Cunha Cerqueira^I; Isaac Amar^II

^IMédicos auxiliares

^IIAcadêmico estagiário

RESUMO

Tendo em vista as diferenças existentes entre as taxas consideradas normais pelos diversos autores para a proteinorraquia, foi feito um estudo para verificar até que ponto tais diferenças podem ser explicadas por condições de técnica.

Quatro métodos de determinação do conteúdo protêico total do liqüido cefalorraquidiano foram analisados - dois baseados em turbidimetria e dois em colorimetria - sendo utilizado o espectrofotômetro Coleman Junior, modêlo 6-A. Os métodos turbidimétricos foram os de Bossak, Rosenberg e Harris e o de Denis e Ayer e os colorimétricos de Macheboeuf e Rebeyrotte e de Dittebrandt. Para cada um foi preparada carta de calibração utilizando diluições cuidadosamente preparadas de misturas de líquores límpidos e incolores, nas quais fôra efetuada, prèviamente, a determinação do teor protêico pelo método de Kjeldahl.

Determinações da taxa protêica foram feitas em certo número de amostras (entre 80 e 100) para cada método, sendo as concentrações correspondentes calculadas mediante a carta de calibração estabelecida. O conteúdo protêico de cada uma delas tinha sido avaliado de modo aproximado pelo método de Nissl. Os dados obtidos mostraram a influência do êrro instrumental efetivo em relação às taxas pequenas, particularmente nos métodos colorimétricos, a qual foi acompanhada de elevação das respectivas médias dos valores de concentração. Esta elevação foi evidenciada também em uma série de 20 líquores cujo conteúdo protêico foi determinado concomitantemente pelos quatro métodos; a freqüência de distribuição de quatro séries de amostras, em zonas de concentração, para cada um dos métodos, mostrou um número maior em zonas correspondentes a teores protêicos mais elevados para aquêles métodos sujeitos a êrro instrumental efetivo maior.

Êstes dados vêm trazer um elemento para a compreensão das diferentes taxas consideradas normais na literatura, as quais variam, às vêzes, entre limites muito amplos. A determinação precisa assume grande importância quando encarada do ponto de vista clínico, principalmente quando se tem em vista o estudo dos aumentos discretos que podem ocorrer precocemente em certas afecções neurológicas, servindo de elemento de orientação diagnóstica.

SUMMARY

On the basis of the difference among values stated as normal by different authors to protein content of cerebrospinal fluid the present study was enterprised to verify whether these differences might be introduced by technical conditions. Four methods for protein determination were studied; two based on turbidimetric reactions and two on colorimetric ones. The first two were the trichloracetic acid method of Bossak, Rosenberg and Harris and the sulphosalycilic acid method of Denis and Ayer; the colorimetric methods were those of Dittebrandt (Weichselbaum biuret reagent) and of Macheboeuf and Rebeyrotte (nitric acid reagent). The calibration was conducted in a Coleman Junior spectrophotometer model 6-A with carefully prepared dilutions of pools of cerebrospinal fluids clear and colourless whose protein content was previously determined by the Kjeldahl procedure.

Determination of protein content were made in several specimens of cerebrospinal fluid by each one of the methods and concentrations calculated through the calibration curves established. The protein content of all samples was previously evaluated by the Nissl method in an approximative way. The data obtained showed an influence of the effective instrument error on the normal taxes, specially on the colorimetric methods analised. This was accompanied by a rise in the mean values for each one. The data of twenty specimens whose protein content was estimated concomitantly by the four methods bring further evidence as to agree with this. The frequency of distribution in concentration zones of four series of specimens studied by each one of the methods showed a larger distribution in regions of higher protein concentration for methods with increased influence of effective instrument error.

The present data give a way to understand the different taxes supported as normal in the literature whose range is sometimes too much extent, bringing difficulty in the evaluation of slight increasings in protein content which bare importance in the early diagnosis of some neurological affections.

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BIBLIOGRAFIA

Trabalho da Secção de Liqüido Cefalorraquidiano do Laboratório Central do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Univ. de São Paulo (Serviço do Dr. O. A. Germek), apresentado no XIX Congresso Internacional de Oto-Neuro-oftalmologia (São Paulo, junho de 1954).

Clínica Neurológica. Hospital das Clínicas da Fac. Med. da Univ. de São Paulo - Caixa Postal 3461 - São Paulo, Brasil.

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Proteinorraquia. Estudo crítico de métodos de dosagem

Critical study on some methods for the determination of protein content of the cerebrospinal fluid

Datas de Publicação

Publicação nesta coleção
08 Abr 2014
Data do Fascículo
Dez 1955

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[1] 1. ANDÍA, E. D. - Liquido Céfalo-Raquideo. El Ateneo, Buenos Aires, 1946, pág. 107.

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[22] 22. WIKOFF, H. L.; KAZDAN, P. - A critique of methods for the determination of protein in cerebrospinal fluid. Amer. J. Clin. Pathol., 21:1173 (dezembro) 1951.