Resumen Los conejos han jugado un papel importante en los procesos de investigación oftalmológica, sin embargo, en el medio ha existido una deficiencia de equipos sensibles en la medición de la presión intraocular para esta especie. Para comparar la presión intraocular (PIO) medida con la tonometría de rebote (TONOVET Plus®) y aplanación (TONO-PEN VET®) en conejos Nueva Zelanda sanos y tratados con Amlodipino, fueron usados doce conejos Nueva Zelanda, machos, sanos, de 5 meses de edad y distribuidos en dos grupos con 6 individuos cada uno. El grupo experimental recibió Amlodipino® en una dosis de 5 mg/kg, una vez al día durante un mes. La presión arterial y la presión intraocular se midieron antes del tratamiento y 6 h después del tratamiento en un período de un mes. Se observa una tendencia donde el grupo de animales tratados con amlodipino® presenta valores más bajos que el grupo control, tanto en presión sistólica como diastólica. La presión sistólica del grupo control mostró un promedio de 116,5 ± 7,9 mmHg y 117,4 ± 8,9 mmHg y el grupo de tratamiento mostró un promedio de 113,6 ± 7,9 mmHg y 111,8 ± 10,0 mmHg (pretratamiento y postratamiento respectivamente). Tonometría: los valores obtenidos con el TONOVET Plus® (19 ± 3 mmHg) son en promedio superiores a los valores obtenidos con el TONO-PEN VET® (17 ± 3 mmHg). Fue posible demostrar la relación entre la presión arterial sistémica y la presión intraocular en conejos blancos Nueva Zelanda. La tonometría de rebote mostró menos variabilidad en los resultados que la tonometría de aplanamiento. Este estudio confirmó que ambos tonómetros son confiables para medir la PIO en conejos.

Abstract Rabbits have played an important role in ophthalmological research processes, however in the environment there has been a deficiency of sensitive equipment in measurement of intraocular pressure for this species. To compare intraocular pressure (IOP) measured with rebound (TONOVET Plus®) and applanation (TONO-PEN VET®) tonometry in healthy New Zealand rabbits treated with Amlodipine. Twelve healthy male New Zealand white rabbits, 5 months old; two groups with 6 individuals were used in this study. The experimental group was given Amlodipine® at a dose of 5 mg/kg, once a day for a month. Blood pressure and intraocular pressure were measurement before treatment and 6 h after treatment in a period of one month. A trend is noted where the group of animals treated with amlodipine® presents lower values than the control group, both in systolic and diastolic pressure. The systolic pressure of the control group showed an average of 116.5 ± 7.9 mmHg and 117.4 ± 8.9 mmHg and the treatment group showed an average of 113.6 ± 7.9 mmHg and 111.8 ± 10.0 mmHg (pretreatment and posttreatment respectively). Tonometry: the values obtained using the TONOVET Plus® (19 ± 3 mmHg) are on average higher than the values obtained using the TONO-PEN VET® (17 ± 3 mmHg). It was possible to demonstrate the relationship between systemic blood pressure and intraocular pressure in New Zealand white rabbits. Rebound tonometry showed less variability in results than applanation tonometry. This study confirmed that both tonometers are reliable for measuring IOP in rabbits.

Resumo Os coelhos têm desempenhado um papel importante nos processos de pesquisa oftalmológica, porém no meio tem havido uma deficiência de equipamentos sensíveis na medida da pressão intraocular para esta espécie. Comparar a pressão intraocular (PIO) medida com tonometria de rebote (TONOVET Plus®) e de aplanação (TONO-PEN VET®) em coelhos saudáveis da Nova Zelândia tratados com Amlodipina®. Foram utilizados neste estudo doze coelhos brancos da Nova Zelândia, machos saudáveis, 5 meses de idade; distribuído em dois grupos com 6 indivíduos cada um. O grupo experimental recebeu Amlodipina® na dose de 5 mg / kg, uma vez ao dia durante um mês. A pressão arterial e a pressão intraocular foram medidas antes do tratamento e 6 horas após o tratamento em um período de um mês. Nota-se uma tendência onde o grupo de animais tratados com amlodipina® apresenta valores inferiores ao grupo controle, tanto na pressão sistólica quanto na diastólica. A pressão sistólica do grupo controle apresentou média de 116,5 ± 7,9 mmHg e 117,4 ± 8,9 mmHg e o grupo tratamento apresentou média de 113,6 ± 7,9 mmHg e 111,8 ± 10,0 mmHg (pré-tratamento e pós-tratamento, respectivamente). Tonometria: os valores obtidos com o TONOVET Plus® (19 ± 3 mmHg) são em média superiores aos valores obtidos com o TONO-PEN VET® (17 ± 3 mmHg). Foi possível demonstrar a relação entre a pressão arterial sistêmica e a pressão intraocular em coelhos brancos da Nova Zelândia. A tonometria de rebote mostrou menos variabilidade nos resultados do que a tonometria de aplanação. Este estudo confirmou que ambos os tonômetros são confiáveis para medir a PIO em coelhos.

Resumen Ante la necesidad de desarrollar nuevos medicamentos para el tratamiento de la leishmaniasis cutánea que sean efectivos, seguros, de mayor aceptación entre los pacientes, fáciles de administrar en los entornos rurales y más económicos, en el presente estudio se evaluó in vitro e in vivo el potencial terapéutico y el perfil de citotoxicidad de un extracto etanólico y un extracto glicólico de las ramas de Caesalpinia spinosa (Molina) Kuntze y sus respectivas formulaciones: loción y emulsión. Asimismo, se validó la utilidad de las dos formulaciones como tratamiento tópico en diez pacientes con leishmaniasis cutánea no complicada. Ambos extractos fueron activos contra Leishmania braziliensis en concentraciones de menos de 22 μg/mL, tuvieron baja toxicidad en las células U-937 y HL60 cuando se administraron en forma pura y en las células Hep G2 y Detroit 551 cuando se administraron en concentraciones de menos de 20 %. Ni los extractos ni las formulaciones fueron irritantes o corrosivos y no causaron ningún otro tipo de toxicidad dérmica. La exposición de fibroblastos al extracto glicólico y a las formulaciones favoreció su migración y la reparación de la monocapa luego de 16 horas de contacto, permitiendo cierres de la brecha entre 33,9 y 70,9 %. Tanto los extractos como las formulaciones favorecieron la curación completa de los hámsteres con leishmaniasis cutánea en porcentajes mayores al 80 %. La loción y la emulsión se absorben y penetran en la piel después de su aplicación y, aunque se alcanzan a detectar en plasma hasta las 24 h (la loción) o las 6 h (la emulsión) de la aplicación, la mayor parte queda retenida en la piel. Por último, el tratamiento de los diez pacientes con la loción y la emulsión logró la curación completa de las lesiones con la reparación de la piel dañada y sin efectos adversos. En conclusión, los resultados demostraron las propiedades leishmanicidas y cicatrizantes de C. spinosa, lo que le permitiría ser una alternativa segura para el tratamiento local de la leishmaniasis cutánea. Es necesario validar estos resultados en ensayos clínicos controlados y determinar la eficacia y la seguridad del tratamiento con los productos fitoterapéuticos de C. spinosa.

Abstract Given the need to develop new drugs for the treatment of cutaneous leishmaniasis, not only effective and safe, but also more widely accepted by patients, easily administered in rural settings and cheaper, in the present study the in vitro and in vivo therapeutic potential and cytotoxicity profile of an ethanolic and a glycolic extracts obtained from the branches of Caesalpinia spinosa (Molina) Kuntze and their respective formulations (lotion and emulsion) were evaluated. Finally, the usefulness of the two formulations as topical treatment was validated in 10 patients with uncomplicated CL. Both extracts were active against L. braziliensis at concentrations <22 μg / mL, with low toxicity in U-937 and HL60 cells when administered pure and for Hep G2 and Detroit 551 cells when administered at concentrations <20%. Neither the extracts nor the formulations were irritating or did not cause any corrosive or any other sign of dermal toxicity. The exposure of fibroblasts to the glycolic extract and to the formulations favored the migration of fibroblasts and repair of the monolayer after 16 h of contact, allowing the closing of the gap between 33.9% and 70.9%. Both the extracts and the formulations favored the complete cure of the hamsters with cutaneous leishmaniasis in percentages greater than 80%. After being applied to the skin, lotion and emulsion are absorbed, penetrate, and although they can be detected in plasma up to 24 hours (the lotion) or 6 hours (the emulsion) after application, most of the products it is retained in the skin. Lastly, the treatment of 10 patients with the lotion and the emulsion showed the complete healing of the lesions with the repair of the damaged skin and without adverse effects. In conclusion, the results demonstrate leishmanicidal and healing properties for C. spinosa that give it the potential to become a safe alternative for the local treatment of cutaneous leishmaniasis. It is necessary to validate these results in controlled clinical trials and determine the efficacy and safety of treatment with C. spinosa phytotherapeutic products.

Abstract: A Perkin type condensation reaction between quinaldine and 8-hydroxyquinaldine with aromatic aldehydes, three styrylquinolines were synthesized: (E)-2-ethoxy-4-(2-(8-hydroxyquinolin-2-il)vinyl)phenyl acetate (1), 2-[(E)-2-(2-acetiloxy-5-nitrophenyl)ethenyl] quinoline (2), 2-[(E)-2-(3-methoxyiphenyl)ethenyl] quinoline (3). The leishmanicidal potential in vitro employing flow cytometry was determined and the cytotoxicity by MTT method, was evaluated. The compounds (1) y (2) showed to be active against Leishmania (V) panamensis with lethal dose 50%) (LD50) de 0.2 and 2.5 µg/mL, LD50 de 2.8 and 5.9 µg/mL and selectivity index of 14.0 and 2.4, respectively, compared to the drug control amphotericin B. The structures of these compounds were confirmed using spectroscopic techniques from analysis: IR, 1H and 13C NMR, COSY, HMQC, HMBC and DEPT experiments. Three styrylquinolines were synthesized with performance of 40.3%, 72.0% and 80.0% respectively, styrylquinolines (1) and (2) showed good leishmanicidal potential with inhibition percentages of 67.5 y 74.9 respectively.

Resumen: A partir de la reacción de condensación tipo Perkin entre quinaldina y la 8-hidroxiquinaldina con aldehídos aromáticos se sintetizaron tres estirilquinolinas: (E)-2-etoxi-4-(2-(8-hidroxiquinolin-2-il)vinil)fenil acetato (1), 2-[(E)-2-(2-acetiloxi-5-nitrofenil)etenil] quinolina (2), 2-[(E)-2-(3-metoxifenil)etenil] quinolina (3). Se determinó potencial leishmanicida in vitro empleando citometría de flujo y citotoxicidad por el método MTT. Los compuestos (1) y (2) mostraron ser activos contra Leishmania (V) panamensis con valores de concentración letal 50% (CL50) de 0.2 y 2.5 µg/mL, CL50 de 2.8 y 5.9 µg/mL e índices de selectividad de 14.0 y 2.4, respectivamente, comparados con el medicamento control anfotericina B. Las estructuras de estos compuestos se confirmaron empleando técnicas espectroscópicas de análisis como IR, RMN-1H y 13C, COSY, HMQC, HMBC y experimentos DEPT. Se sintetizaron tres estirilquinolinas con rendimientos de 40.3%, 72.0% y 80.0% respectivamente, las estirilquinolinas (1) y (2) mostraron buen potencial leishmanicida con porcentajes de inhibición de 67.5 y 74.9 respectivamente.

ABSTRACT Citrus fruits are recognized as an important source of bioactive molecules such as limonin and nomilin. However, these molecules exhibit low bioavailability, therefore, obtaining these molecules using biotechnological techniques may be an alternative to harvesting them directly from fruits. The aim of this study was to quantify and identify limonoids in the dichloromethane extracts of Citrus seeds of Criolla orange, Oneco tangerine, Tangerine-lemon, Sour orange and Valencia orange from department of Antioquia-Colombia by high performance liquid chromatography with diode array detection, and high-resolution mass spectrometry. Although in all the samples total glycosidic free limonoids were present, Oneco tangerine seeds had the highest concentration, followed by Tangerine-lemon seeds, equivalent to 0.75% and 0.53% per total dry weight, respectively. These results suggest Oneco tangerine seeds may be used as an elite material for biotechnological processes looking for increased production of limonoids to support research and drug development.

Resumen Introducción. El estudio de la interacción entre el parásito, el vector y los huéspedes mamíferos, incluido el hombre, permite entender el comportamiento de la leishmaniasis. Objetivo. Determinar la presencia de especies del género Lutzomyia y detectar la infección por Leishmania spp. en Didelphis marsupialis en un área endémica de leishmaniasis visceral. Materiales y métodos. Se recolectaron flebotomíneos y D. marsupialis con trampas CDC y Tomahawk™, respectivamente. Las especies de Lutzomyia se identificaron usando la clave de Young y Duncan, 1994. Se tomaron biopsias de oreja, cola y muestras de sangre de D. marsupialis para diagnosticar Leishmania spp. mediante la amplificación de un fragmento del gen de la proteína de choque térmico de 70 kD. Resultados. Se identificaron siete especies de Lutzomyia: Lu. evansi, Lu. gomezi, Lu. panamensis, Lu. dubitans, Lu. cayennensis cayennensis, Lu. rangeliana y Lu. trinidadensis. Las tres primeras especies son reconocidas como vectores en el país por estar implicadas en la transmisión de Leishmania spp. En total, 65 muestras de tejidos de oreja, cola y de sangre provenientes de 19 D. marsupialis fueron negativas para Leishmania spp. en la PCR-HSP70. Conclusiones. La presencia de flebotomíneos con importancia epidemiológica en la zona evaluada representa un riesgo de transmisión. Asimismo, Lu. panamensis es reportada por primera vez en El Bledo (Carmen de Bolívar). La ausencia de Leishmania spp. en D. marsupialis podría sugerir que esta especie no tiene un papel importante en el ciclo de transmisión de Leishmania en la vereda El Bledo, por lo que es necesario profundizar en estudios longitudinales para corroborar esta hipótesis.

Abstract Introduction: The study of the interaction between the parasite, the vector and the mammalian hosts, including man, allows to understand the behavior of the leishmaniases. Objective: To determine the presence of Lutzomyia species and to detect the Leishmania infection in Didelphis marsupialis in an endemic area for visceral leishmaniasis. Materials and methods: Phlebotomine fauna and individuals of D. marsupialis were collected with CDC and Tomahawk™ traps, respectively. The species of Lutzomyia were identified using the Young and Duncan key (1994). Ear and tail biopsies and blood samples from D. marsupialis were taken to identify the Leishmania species by amplifying a fragment of the gene associated with the 70 kD heat shock protein. Results: Seven Lutzomyia species were identified: Lu. evansi, Lu. gomezi, Lu. panamensis, Lu. dubitans, Lu. cayennensis cayennensis, Lu. rangeliana and Lu. trinidadensis. The first three species have epidemiological importance in Colombia because of their implications in the transmission of the Leishmania parasite. Sixty-five tissue samples from 19 D. marsupialis individuals were negative for Leishmania spp. Conclusions: The presence of the Lutzomyia species that have been identified as vectors for Leishmania inside and around houses in the village of El Bledo, in El Carmen de Bolívar represents a risk of infection. Furthermore, the presence of Lu. panamensis is reported for first time in El Carmen de Bolívar in Colombia. Although the lack of detection of Leishmania spp. in D. marsupialis samples may suggest that D. marsupialis does not play an important role in the transmission cycle of Leishmania in this region, it is necessary to carry out further longitudinal studies to confirm this hypothesis.

Abstract The phytochemical study was carried out and the antioxidant and leishmanicidal activity of the Pilocarpus alvaradoi species was evaluated. Identification of the compounds was performed by the analysis of NMR-1H, 13C and MS data. Antioxidant activity was assessed using the DPPH• and ABTS•+ methods; the leishmanicidal potential in vitro was measured against strains of Leishmania (V) panamensis by flow cytometry and cytotoxicity by the MTT method. Of this species, six compounds were isolated and identified: a coumarin, an alkaloid, three sterols and a fatty acid. The ethanolic bark extract showed low cytotoxicity with a CL50 of 70.5 μg/ml and a good leishmanicidal potential with an EC50 of 30.7 μg/ml compared to amphotericin B. The extracts of Pilocarpus alvaradoi constitute an important source of metabolites with biological activity; and the substances obtained are reported for the first time for this specie.

Resumen Se realizó el estudio fitoquímico y se evaluó la actividad antioxidante y leishmanicida de la especie Pilocarpus alvaradoi. La identificación de los compuestos se realizó mediante el análisis de datos de RMN-1H, 13C y EM. La actividad antioxidante se evaluó usando los métodos DPPH• y ABTS•+; el potencial leishmanicida in vitro fue medido frente a cepas de Leishmania (V) panamensis mediante citometría de flujo y la citotoxicidad por el método MTT. De esta especie se aislaron e identificaron seis compuestos: una cumarina, un alcaloide, tres esteroles y un ácido graso. El extracto etanólico de corteza mostró baja citotoxicidad con una CL50 de 70.5 µg/ml y un buen potencial leishmanicida con una CE50 de 30.7 µg/ml comparado con la Anfotericina B. Los extractos de Pilocarpus alvaradoi constituyen una importante fuente de metabolitos con actividad biológica; y las sustancias obtenidas son reportadas por primera vez para esta especie.

Las leishmaniasis son endémicas en >98 países con 14 millones de infectados. Leishmania sobrevive en los mamíferos aún después del tratamiento pero se desconoce su capacidad de persistir en piel sana e infectar vectores. Para demostrar la migración de Leishmania (Viannia) panamensis a piel sana, su persistencia en estos sitios durante estados crónicos de infección y la infectividad de los parásitos persistentes para Lutzomyia longipalpis, se inocularon 10 hámsters intradérmicamente en pata con 2x10(7)promastigotes de L. (V.) panamensis. Los hámsters se sacrificaron a las 13 (fase aguda) y 53 (fase crónica) semanas post-infección. Biopsias de lesión, piel sana y otros tejidos se analizaron por reacción en cadena de la polimerasa (PCR) con el gen Hsp70 y qPCR con el gen DNA polymerase. La transmisión de los parásitos a Lu. longipalpis se determinó mediante xenodiagnóstico. Todas las muestras de fase aguda (excepto oreja contralateral) y todas las muestras de fase crónica fueron positivas, aunque la positividad en fase crónica fue menor que en fase aguda. Dos animales de fase aguda y un animal de fase crónica fueron infecciosos al vector, después de alimentarse sobre la lesión. No hubo ningún insecto positivo en los alimentados sobre piel sana. Se reporta por primera vez la diseminación y persistencia de L. (V) panamensis, y se confirma la persistencia en un periodo de 53 semanas. Sin embargo la carga parasitaria en tejidos diferentes al sitio de inóculo fue baja y no se detectó su transmisión al vector. La PCR con Hsp70 y qPCR con DNA polymerase son técnicas útiles en la determinación del estatus infeccioso en los hospederos vertebrados.

Leishmaniasis are endemic in >98 countries with 14 million people infected. Leishmania survives in mammal hosts even after treatment but the capacity to persist in healthy skin and infect sandflies from these sites is poorly understood. To demonstrate migration of Leishmania (V.) panamensis into healty skin, persistence in these sites during chronic stages of infection and infectivity of persistant parasites to Lutzomyia longipalpis 10 hamsters were inoculated intradermally in the hind footpad, with 2x10(7) L. (V.) panamensis promastigotes. Hamsters were sacrificed at 13 (acute phase) and 53 (chronic phase) weeks post-infection. Biopsies from lesion, healty skin and othert tissues were screened by Hsp70 polymerase chain reaction (PCR) and DNA polymerase qPCR. Transmission of parasites to sandflies was determined by xenodiagnosis. Positivity was observed in all samples of acute infection group except the contralateral ear and chronic infection group, although the percentage of positivity in chronic infection was lower than that for acute infection. Two animals of the acute infection group and one from the chronic infection group were infective to sand flies after feeding over the lesion site. No infections were found in sandflies fed from healthy skin. Dissemination and persistence of L. (V.) panamensis was reported for first time and persisntace is confirmed for a period of 53 weeks. However, parasite load in tissues different from the inoculation site was lower and transmission to the sand fly vectors from these sites was not observed. Hsp70 PCR and qPCR are useful techniques for determining infection status of vertebrate hosts.

Objective Using cost-benefit analysis for comparing the thin-layer agar culture method to the standard multiple proportion method used in diagnosing multidrug-resistant tuberculosis (MDR TB). Methods A cost-benefit evaluation of two diagnostic tests was made at the Corporación para Investigaciones Biológicas (CIB) in Medellín, Colombia. Results 100 patients were evaluated; 10.8 % rifampicin resistance and 14.3 % isoniazid resistance were found. A computer-based decision tree model was used for cost-effectiveness analysis (Treeage Pro); the thin-layer agar culture method was most cost-effective, having 100 % sensitivity, specificity and predictive values for detecting rifampicin and isoniazid resistance. The multiple proportion method value was calculated as being US$ 71 having an average 49 day report time compared to US$ 18 and 14 days for the thin-layer agar culture method. Discussion New technologies have been developed for diagnosing tuberculosis which are apparently faster and more effective; their operating characteristics must be evaluated as must their effectiveness in terms of cost-benefit. The present study established that using thin-layer agar culture was cheaper, equally effective and could provide results more quickly than the traditional method. This implies that a patient could receive MDR TB treatment more quickly.

Objetivo Realizar un análisis de costo efectividad comparando el método de cultivo en agar de capa delgada y el método estándar de proporciones múltiples, utilizados en el diagnóstico de Tuberculosis Multi-drogorresistente (TB MDR). Métodos Estudio de evaluación económica en el cual se evalúan los costos y la efectividad de dos pruebas diagnósticas, ejecutado en la Corporación para Investigaciones Biológicas-CIB en Medellín, Colombia. Resultados Se evaluaron 100 pacientes, encontrando una prevalencia de resistencia a la Rifampicina de 10,8 % y resistencia a Isoniazida de 14,3 %. Se presenta un análisis en términos de costo-efectividad mediante el diseño de un árbol de decisiones (Treeage Pro ®), resultando ser la prueba basada en cultivo en agar de capa delgada más costo-efectiva; con valores de sensibilidad, especificidad y predictivos del 100 % para detectar resistencia a Rifampicina e Isoniazida. El valor del método de las proporciones múltiples fue calculado en US$ 71, con una media de tiempo para ser reportado de 49 días versus US$ 18 y 14 días respectivamente para el cultivo en agar de capa delgada. Discusión Se han desarrollado nuevas tecnologías para el diagnóstico de Tuberculosis, aparentemente más rápidas y efectivas, que deben ser evaluadas no solo en sus características operativas, sino también en términos de costo-efectividad. El presente estudio establece que el empleo de la capa delgada es menos costoso, igualmente efectivo, y puede aportar resultados más rápidamente; cuando se compara con el método tradicional. Esto implica, entre otros aspectos, que el paciente pueda recibir más oportunamente el tratamiento dirigido para TB MDR.

Objetivo Realizar un análisis de costo efectividad comparando el método de cultivo en agar de capa delgada y el método estándar de proporciones múltiples, utilizados en el diagnóstico de Tuberculosis Multi-drogorresistente (TB MDR). Métodos Estudio de evaluación económica en el cual se evalúan los costos y la efectividad de dos pruebas diagnósticas, ejecutado en la Corporación para Investigaciones Biológicas-CIB en Medellín, Colombia. Resultados Se evaluaron 100 pacientes, encontrando una prevalencia de resistencia a la Rifampicina de 10,8 % y resistencia a Isoniazida de 14,3 %. Se presenta un análisis en términos de costo-efectividad mediante el diseño de un árbol de decisiones (Treeage Pro ®), resultando ser la prueba basada en cultivo en agar de capa delgada más costo-efectiva; con valores de sensibilidad, especificidad y predictivos del 100 % para detectar resistencia a Rifampicina e Isoniazida. El valor del método de las proporciones múltiples fue calculado en US$ 71, con una media de tiempo para ser reportado de 49 días versus US$ 18 y 14 días respectivamente para el cultivo en agar de capa delgada. Discusión Se han desarrollado nuevas tecnologías para el diagnóstico de Tuberculosis, aparentemente más rápidas y efectivas, que deben ser evaluadas no solo en sus características operativas, sino también en términos de costo-efectividad. El presente estudio establece que el empleo de la capa delgada es menos costoso, igualmente efectivo, y puede aportar resultados más rápidamente; cuando se compara con el método tradicional. Esto implica, entre otros aspectos, que el paciente pueda recibir más oportunamente el tratamiento dirigido para TB MDR.

Objective Using cost-benefit analysis for comparing the thin-layer agar culture method to the standard multiple proportion method used in diagnosing multidrug-resistant tuberculosis (MDR TB). Methods A cost-benefit evaluation of two diagnostic tests was made at the Corporación para Investigaciones Biológicas (CIB) in Medellín, Colombia. Results 100 patients were evaluated; 10.8 % rifampicin resistance and 14.3 % isoniazid resistance were found. A computer-based decision tree model was used for cost-effectiveness analysis (Treeage Pro); the thin-layer agar culture method was most cost-effective, having 100 % sensitivity, specificity and predictive values for detecting rifampicin and isoniazid resistance. The multiple proportion method value was calculated as being US$ 71 having an average 49 day report time compared to US$ 18 and 14 days for the thin-layer agar culture method. Discussion New technologies have been developed for diagnosing tuberculosis which are apparently faster and more effective; their operating characteristics must be evaluated as must their effectiveness in terms of cost-benefit. The present study established that using thin-layer agar culture was cheaper, equally effective and could provide results more quickly than the traditional method. This implies that a patient could receive MDR TB treatment more quickly.

La anhidrasa carbónica (AC) cataliza la conversión reversible del CO2 a bicarbonato y participa en mecanismos de alcalinización en el intestino de mosquitos. Se evalúo la toxicidad de cuatro inhibidores de anhidrasa carbónica (IAC): acetazolamida (AZM), metazolamida (MZM), etoxzolamida (ETX) y dorzolamida (DZA) en larvas de Anopheles albimanus por monitoreo de mortalidad 24, 48 y 72 horas post aplicación, a una concentración de 50 ug/ ml diluido previamente en dimetil sulfóxido. Todos los IAC redujeron la población de larvas en proporciones variables. La ETX mostró la mayor toxicidad que las AZM, MZM y DZA alcanzando una mortalidad superior al 80% después de 24 horas y del 98% después de 72 horas de su aplicación. Nuestros resultados indican que de los IAC, la etoxzolamida, en particular, constituye un candidato valioso como una nueva alternativa de control de formas inmaduras de An. albimanus, considerado el vector primario de malaria en Colombia.

Carbonic anhydrase (CA) catalyzes the reversible conversion of CO2 to bicarbonate and participates in mechanisms of alkalinization in the intestine of mosquitoes. The toxicity of four CA inhibitors (CAI): acetazolamide (AZM), methazolamide (MZM), ethoxolamide (ETX) and dorzolamide (DZA) were evaluated in larvae of Anopheles albimanus by monitoring mortality 24, 48 and 72 hours post application, at a concentration of 50 ug/ml diluted in dimethyl sulfoxide previously. All IAC reduced the population of larvae in variable proportions. ETX showed the highest toxicity, achieving more than 80% mortality after 24 hours and 98% after 72 hours of application. The CAI, AZM, MZM and DZA showed less toxicity (<50% mortality). Our results indicate that the CAI, including ETX in particular, is a worthy candidate as an alternative for the control of An. albimanus, which is considered a primary vector of malaria in Colombia.

In Colombia, pentavalent antimonials and miltefosine are the drugs of choice for the treatment of cutaneous leishmaniasis; however, their toxicity, treatment duration, (treatment adherence problems), cost, and decreased parasite sensitivity make the search for alternative treatments of American cutaneous leishmaniasis necessary. Based on the results found in a controlled, open, randomized, phase III clinical trial, the efficacy and safety of miltefosine was compared to that of thermotherapy for the treatment of cutaneous leishmaniasis in Colombia. Adult patients from the Colombian army participated in the study; they received either 50 mg of miltefosine three times per day for 28 days by the oral route (n = 145) or a thermotherapy (Thermomed®) application of 50 °C for 30 seconds over the lesion and surrounding area (n = 149). Both groups were comparable with respect to their sociodemographic, clinical, and parasitological characteristics. The efficacy of miltefosine by protocol and by intention to treat was 70% (85/122 patients) and 69% (85/145 patients), respectively. The adverse effects were primarily gastrointestinal for miltefosine and pain at the lesion site after treatment for thermotherapy. No statistically significant difference was found in the efficacy analysis (intention to treat and protocol) between the two treatments. ClinicalTrials.gov: NCT00471705.

En Colombia antimoniales pentavalentes y miltefosina son los medicamentos de primera elección para el tratamiento de la leishmaniosis cutánea; sin embargo, su toxicidad, duración (que lleva a problemas de adherencia), costo y la disminución de la sensibilidad de los parásitos a los mismos, hacen necesaria la búsqueda de nuevas alternativas de tratamiento para la leishmaniosis cutánea americana. A partir de resultados derivados de un ensayo clínico controlado abierto, aleatorizado, fase III, se comparó la eficacia y seguridad de la miltefosina con la de la termoterapia, para el tratamiento de la leishmaniosis cutánea en Colombia. Adultos pertenecientes al Ejército de Colombia participaron el estudio. Miltefosina, una cápsula de 50 mg tres veces día durante 28 días, vía oral (n = 145). Termoterapia (Thermomed®) aplicación de 50 °C/30" sobre la lesión y el área circundante (n = 149). Ambos grupos fueron comparables en características sociodemográficas, clínicas y parasitológicas. Eficacia de la miltefosina por protocolo 70% (85/122 pacientes) y 69% (85/145 pacientes) por intención a tratar. Termoterapia eficacia por protocolo 64% (86/134 pacientes) y 58% (86/149 pacientes) por intención a tratar. En miltefosina los eventos adversos fueron principalmente de tipo gastrointestinal y en termoterapia se encontró dolor en el sitio de la lesión luego del tratamiento. En el análisis de eficacia (intención a tratar y protocolo) no se encontró diferencia estadísticamente significativa entre los tratamientos evaluados. ClinicalTrials.gov: NCT00471705.

Introducción: Los sistemas in vitro son útiles en la evaluación de compuestos con actividad biológica, permitiendo por ejemplo, determinar el potencial citotóxico y leishmanicida de un compuesto. Objetivo: Identificar el tipo de célula mamífera que permita una óptima infección in vitro por Leishmania y que constituya el sistema adecuado para el tamizaje in vitro de compuestos con actividad anti-Leishmania. Métodos: La susceptibilidad de las células a infección por L. panamensis se evalúo según la Concentración Infectiva 50 determinada por microscopía de luz y citometría de flujo; la supervivencia intracelular de los amastigotes se evaluó por microscopía de fluorescencia y la sensibilidad de las células a anfotericina B y antimoniato de meglumina se evalúo por espectrofotometría. Resultados: Los cultivos primarios son más susceptibles a la infección por L. panamensis in vitro. Sin embargo, la supervivencia intracelular del parásito fue mejor en U-937. Por su parte, la sensibilidad de las células a anfotericina B y antimoniato de meglumina vario según el tipo de célula. Conclusión: Las células U-937 son las adecuadas para la infección por Leishmania porque: a) presentan crecimiento ilimitado y se les puede inducir transformación a macrófagos. b) la susceptibilidad a la infección por Leishmania es similar a la observada en cultivos primarios de macrófagos y c) permiten mayor supervivencia de los amastigotes luego de la infección. Adicionalmente, las células U-937 son menos sensibles a la acción de los fármacos comúnmente utilizados como control en la detección de compuestos con actividad leishmanicida. Salud UIS 2010; 42: 200-211

Introduction: In vitro systems are useful in the evaluation of compounds with biological activity determining the cytotoxic and leishmanicidal activity of the candidates. Objective: To identify the mammalian cell that allows the optimal in vitro infection by Leishmania and therefore, identify the suitable system for the in vitro evaluation of leishmanicidal activity of drugs. Methodology: The susceptibility to the infection by L. panamensis was evaluated according to the Infective Concentration 50 tested by light microscopy and flow citometry; the intracellular survival of amastigotes was determined by fluorescence microscopy and the sensitivity to amphotericine B and meglumine antimoniate was evaluated by spectrophotometry. Results: The primary culture cells were more susceptible to the in vitro infection by L. panamensis because they did require fewer parasites per cell ratio to achieve the 50% infection rate whereas the intracellular survival of parasites was better in the U-937 cells. All cells showed differential sensitivity to amphotericine B and meglumine antimoniate. Conclusion: The U-937 cells are the most suitable model for the in vitro infection by L. panamensis because: a) they are a cell line with unlimited growth where transformation into macrophages can be induced. b) The susceptibility to infection by L. panamensis is similar to that observed in primary cultures macrophages and, c) They allow the intracellular survival of amastigotes after the infection process. In addition the U-937 cells are less sensitive to the action of the commonly drugs used as a control in the screening of compounds with leishmanicidal activity. Salud UIS 2010; 42: 200-211

Este estudio describe la evaluación de las actividades citotóxica y leishmanicida del aceite esencial de Matricaria chamomilla, una planta conocida como "manzanilla" a la que se le atribuye una variedad de usos en la medicina tradicional. La actividad del aceite esencial se evaluó in vitro contra amastigotes axénicos de L. (V) braziliensis, a concentraciones menores o iguales que 250µg/ml, y amastigotes intracelulares de L. (V) braziliensis y L. (V) panamensis, a concentraciones menores o iguales que 30µg/ml. Por su parte, la actividad citotóxica se evaluó contra células mamíferas de la línea promonocítica humana U-937, a concentraciones por debajo de 1,0 mg/ml. El aceite esencial de manzanilla mostró ser activo contra amastigotes intracelulares de L. (V) panamensis y L. (V) braziliensis (CE50 de 2,87 y 10,30µg /ml, respectivamente). Aunque el aceite esencial de manzanilla también mostró ser potencialmente tóxico para las células mamíferas (CL50 de 30,21µg /ml), esta toxicidad fue similar a la mostrada por la Anfotericina B (CL50 de 31,39µg /ml). El aceite esencial de manzanilla no mostró actividad contra las formas axénicas de L. (V) braziliensis, demostrando la importancia del metabolismo del compuesto en el interior de la célula para que se produzca el metabolito activo contra el parásito. Estos resultados aportan bases para sugerir que el aceite esencial de manzanilla tiene potencial para el desarrollo de medicamentos contra Leishmania, el cual debe ser validado en estudios futuros in vivo en modelos animales.

This study describes the evaluation of cytotoxic and leishmanicidal activities for Matricaria chamomilla essential oil. M. chamomilla is a plant commonly named "manzanilla" that has many uses in traditional medicine. The activity of essential oil was evaluated in vitro against axenic amastigotes of L. (V) braziliensis at concentrations lower than or equal to 250µg/ml and intracellular amastigotes of L. (V) braziliensis and L. (V) panamensis at concentrations lower than or equal to 30µg/ml. On other hand, the cytotoxic activity was assessed against mammalian cells of the promonocytic human cell line U937 at concentrations below 1.0mg/ml. The essential oil of M. chamomilla showed activity against intracellular amastigotes of L. (V) panamensis and L. (V) braziliensis (EC50 of 2.87 and 10.30µg/ml, respectively). Although the essential oil of M. chamomilla also shown to be potentially toxic to mammalian cellsLC50 ( of 30.21µg ml) this toxicity was similar to that shown by Amphotericin B (LC50 of 31.39µg/ml). This essential oil showed no activity against axenic forms of L. (V) braziliensis suggesting the importance of the compound metabolism inside cells to produce the metabolite that would be active against parasites. These results suggest that the essential oil of M. chamomilla has potential for development of drugs anti- Leishmania that must be validated in future studies in vivo using animal models.

En este trabajo se describe la síntesis de hidrazonas derivadas de cromano, tiocromano, alquil y aril hidrazonas, su actividad leishmanicida y su efecto sobre proteasas de cisteína de L. (V) panamensis. Se sintetizan feniltiocromanos y bencil y naftil derivados; solamente las fenilhidrazonas muestran alguna actividad sobre amastigotes de Leishmnia (V) panamensis. No se observa ningún efecto sobre una proteasa de cisteína del parásito lo que sugiere un mecanismo de acción diferente a la inhibición de esta enzima.

In this paper, the synthesis of hydrazones derived from cromano, thiocroman, alkyl and aril hydrazones is described, as well as their leishmanicidal activity and their effect on cysteine proteases from L. (V) panamensis. A series of novel phenylthiochromane and benzyl and naphtyl derivatives are synthesized and evaluated for their cytotoxic and antileishmanial activities. Their effect on parasite cysteine protease is also evaluated. Only phenylthiochromane derivatives display some activity against Leishmania (V) panamensis but all compounds are inactive against parasitic cystein protease. These results may suggest a different mechanism of action for these compounds.